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目的:探讨黄连提取物对白念珠菌丝侵袭口腔念珠菌病(Oropharyngeal candidiasis,OPC)小鼠口腔的抑制作用及机制,旨在为其治疗口腔念珠菌病提供实验依据。方法:1.首先回流醇提取中药黄连得黄连提取物(Extract of Coptidis Rhizoma,ECR)后,从体内体外两方面实验进行实验。(1)体内实验:构建小鼠口腔念珠菌病(OPC)模型,使用结晶紫染色、HE染色、PAS染色及小鼠整体表现检测来验证OPC模型构建是否成功。模型成功后分为正常对照组、模型组、ECR高浓度组(240 mg/mL)、ECR中浓度组(120 mg/mL)、ECR低浓度组(60 mg/mL)、制霉菌素阳性药组(135 mg/mL);给予高、中、低浓度的ECR和制霉菌素进行口腔涂抹治疗,每天3次,正常对照组和模型组小鼠则以生理盐水涂抹。持续干预10天后,通过小鼠症状和体征、真菌镜检、真菌载荷量测定以及组织病理学检查来评价ECR的疗效;以扫描电镜、荧光显微镜等来观察ECR对白念珠菌丝侵袭小鼠口腔黏膜组织的影响。(2)体外实验:以XTT还原法评价ECR对白念珠菌丝代谢活性的影响;固体平板上观测ECR对白念珠菌落边缘生长变化影响;半固体培养基上观测ECR对白念珠菌丝生长影响;液体培养基上ECR对白念珠菌菌丝生长情况影响;扫描电镜下观察ECR对白念珠菌丝形态的影响;荧光显微镜观察ECR对白念珠菌丝形态及活力的影响;使用qRT-PCR法检测ECR对白念珠菌丝侵袭素ALS3、SSA1基因表达变化的影响。结果:体内实验表明,结晶紫染色、HE染色、PAS染色及小鼠症状体征的检测能够验证OPC模型构建成功;中浓度组ECR对OPC小鼠舌组织黏膜损伤有一定疗效,高浓度组ECR能完全恢复OPC小鼠舌黏膜的损伤;体外实验表明,XTT法显示随着ECR浓度的升高(64、128、256 mg/mL),白念珠菌菌丝代谢活力逐渐降低;在固体培养基、液体培养基、半固体培养基上,128、256 mg/mL ECR能显著抑制白念珠菌落边缘生长、菌丝形成,及菌丝的侵袭能力;扫描电镜与荧光显微镜发现128、256 mg/mL ECR能显著影响菌丝形成;qRT-PCR法显示,64、128、256 mg/mL ECR能下调侵袭素ALS3、SSA1基因表达。结论:体内外实验显示,黄连提取物(ERC)能通过抑制白念珠菌菌丝的形成,抑制菌丝侵袭素ALS3,SSA1基因的表达降低其对口腔黏膜的侵袭力,从而发挥其治疗OPC的作用。