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牛结核病(Bovine Tubereulosis)主要是由牛结核分枝杆菌(M.bovis)引起的一种慢性传染病。世界动物卫生组织(OIE)将动物牛结核病列为B类动物传染病,在我国也将其列为二类动物疫病。寻找一种快速检测牛结核病的方法,对预防和控制结核病具有重要的意义。 本研究以解淀粉芽胞杆菌的芽胞制备单分散的功能微球,并以此制作成芽胞@Zr4+复合微球;由于Zr+离子有多个结合位点,MPB83抗原蛋白能够有效的通过Zr4+离子偶联到微球表面制备成免疫微球,并用于牛结核分枝杆菌感染血清中MPB83抗体的检测。实验结果表明:该微球具有良好的分散性、稳定性,微球表面氨基、羧基等参与了Zr4+离子的偶联配合作用;MPB83抗原蛋白免疫微球用于牛结核分枝杆菌感染血清中MPB83抗体的检测时,在1∶1,000-1∶20,000具有良好的线性(R2=0.993);其检测限为1∶32,000,远低于商品ELISA检测试剂盒的检测限(1∶5,120; S/N=3);以牛传染性鼻气管炎、牛副结核等六种阳性血清为对照,证明了本研究提出的新型诊断方法具有良好的特异性。此外,用本方法与牛结核分枝杆菌ELISA抗体检测试剂盒同时分析了69份临床牛血清,比较其结果,得到敏感度为71.43%、特异性为97.50%、符合率为86.95%,证明了本方法具有推广应用价值。