目的：探究养老院护理员手卫生现状及影响因素，为养老院制定手卫生促进措施提供科学依据，提高护理员手卫生依从性，以达到减少养老院院内感染发生的目标。　　方法：运用《养老院护理员手卫生知信行问卷》对重庆市7家养老院中的260名护理员进行调查，同时使用《手卫生观察表》对护理员手卫生依从性以暗访形式进行观察。最后，统计分析其结果。　　结果：养老院护理员手卫生知识、态度和行为得分总体处于低位水平，分别为42.3±16.93分、48.0±16.80分和51.5±17.28分；不同学历、工龄的护理员在手卫生知识、态度、行为及总分方面差异有统计学意义（P＜0.05）；养老院护理员手卫生依从性低：医养结合养老院为6.7%，公立养老院为3.1%，民营养老院仅为1.9%。影响护理员执行手卫生措施的主要因素有：手卫生知识存在误区、对待手卫生态度不积极等。　　结论：养老院护理员手卫生现状亟待改进，应针对性地提供手卫生促进措施，以减少养老院院内感染发生。