NADPH氧化酶Nox1和Duox2在小鼠肠炎中的表达和意义

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目的探讨NADPH氧化酶Nox1和Duox2在小鼠肠炎发病中的表达及意义。方法将6-8周龄的C57BL/6小鼠随机分为正常组、1.5%葡聚糖硫酸钠(Dextran sulphate sodium,DSS)组和3%DSS组,每组10只。正常组正常饮水,1.5%和3%DSS组分别自由饮用含有1.5%或者3%DSS的饮水,共6天建立小鼠急性肠炎模型。通过进行疾病活动指数(Disease Activity Index,DAI)评分、结肠长度测定、血便评分和HE染色等方法评估肠道炎症程度。利用生化方法检测血清丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量以及结肠组织中氧化型谷胱甘肽/还原型谷胱甘肽(GSSG/GSH)比率等氧化应激指标,以评估机体氧化应激程度。采用免疫组织化学方法和实时定量PCR技术分别检测小鼠结肠组织中NADPH氧化酶Nox1和Duox2蛋白及mRNA的表达情况。结果1.正常组小鼠无肠炎,1.5%DSS组、3%DSS组小鼠分别呈轻度和重度肠炎:1.5%DSS组、3%DSS组DAI评分与正常组相比均显著增高(P<0.05);1.5%DSS组和3%DSS组小鼠结肠长度均有不同程度的缩短,其中3%DSS组结肠长度缩短严重(均P<0.05);正常组小鼠结肠内无血便,1.5%DSS组、3%DSS组结肠内较正常组均有不同程度的血便(均P<0.05);HE染色评分结果呈现各组炎症程度有明显差别(均P<0.05)。2.氧化应激指标(MDA、GSSG/GSH)在1.5%DSS组升高,而3%DSS组进一步升高(均P<0.05)。3.NADPH氧化酶Nox1与Duox2蛋白和m RNA在不同炎症程度时表达不同:Nox1蛋白和mRNA在正常组呈高表达,在1.5%DSS组表达下调(P<0.05),在3%DSS组进一步下调(P<0.05);Duox2蛋白和mRNA在1.5%DSS组表达较正常组明显上调(P<0.05),而在3%DSS组表达下调至正常水平。结论Nox1主要在维持肠道黏膜正常防御功能中发挥作用,而Duox2除了维持正常防御功能外,可能还积极地参与肠炎发病过程。
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