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研究目的及背景:在各种组织蛋白酶S(CTSS)的研究中发现,组织蛋白酶S在众多恶性肿瘤(如肝癌、胃癌、膀胱癌等)中的表达量增高,而且参与肿瘤新生血管生成,增加肿瘤侵袭性、转移能力,是肿瘤发生发展及转移的因素之一;在研究中发现蜂毒素具有抗肿瘤特性,对肿瘤的生长具有抑制作用,可诱导肿瘤细胞凋亡。本实验通过使用蜂毒素干预沉默CTSS的MHCC97-H细胞株后,探究沉默CTSS以及蜂毒素对细胞株生长状况的影响;通过建立沉默CTSS的MHCC97-H裸鼠肿瘤模型,使用蜂毒素干预,探讨CTSS和蜂毒素在生物体内是否具有相同的作用。方法:通过制备的沉默CTSS的MHCC97-H细胞株(沉默CTSS的细胞株用PLVT1150表示,正常表CTSS的细胞株用PLVT8表示),使用不同浓度蜂毒素干预细胞株,利用流式细胞仪评价沉默CTSS后对蜂毒素敏感性变化的情况,及蜂毒素对MHCC97-H细胞株凋亡的影响。并制作沉默CTSS的MHCC97-H裸鼠皮下荷瘤模型,使用蜂毒素干预,观察裸鼠移植肿瘤生长的状况,探讨沉默CTSS和蜂毒素在机体内的作用机制。使用免疫组化检测caspase3,cleved-caspase3在裸鼠荷瘤模型中的表达情况,探究蜂毒素和沉默CTSS引起肿瘤细胞凋亡的途径。结果:通过使用不同浓度蜂毒素(0ug/ml、4ug/m、8ug/ml)分别处理PLVT1150细胞株及PLVT8细胞株30分钟后,使用流式细胞仪检测各组凋亡率,该试验重复3次,结果取均数加减标准差表示,其中PLVT1150细胞凋亡率依次为18.87%、36.72%、52.98%,PLVT8凋亡率依次为4.27%、15.32%、28.86%。在沉默CTSS的MHCC97-H裸鼠肿瘤模型中,蜂毒素协同CTSS沉默可显著抑制动物模型肿瘤的生长,表明蜂毒素可能拥有促进MHCC97-H细胞凋亡的作用。在裸鼠肿瘤组织切片的免疫组化实验中检测到蜂毒素干预组caspase-3表达量较对照组减少,而cleaved-caspase-3表达量则增多。在蜂毒素干预沉默CTSS后的MHCC97-H肿瘤组织中,活化的Caspase-3表达显著增加,表明沉默CTSS可引起MHCC97-H细胞调亡,它们之间具有某种联系。结论:慢病毒介导沉默CTSS具有促进MHCC97-H细胞凋亡的作用,蜂毒素能够协同增加沉默CTSS的MHCC97-H细胞的凋亡,根据此特点蜂毒素治疗方案可能为肝细胞癌生物学治疗增加一个新的研究方向。