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自身免疫疾病(autoimmune diseases)是一类自身免疫耐受被打破,激活免疫系统攻击自身抗原而引起组织(器官)损害的疾病。其发病机制尚未完全阐明,认为该病受遗传、感染和免疫等因素共同作用。其中,遗传因素在自身免疫病的发病中起着重要的作用。类风湿性关节炎(RA)和系统性红斑狼疮(SLE)是最常见的自身免疫疾病,二者病理反应的共同点是免疫系统调节功能紊乱。而这种免疫系统功能紊乱的遗传机制依赖于多种基因的共同作用。其中,HLA系统作为机体免疫系统的重要组成部分,其高度的遗传多态性与自身免疫性疾病易感性之间的相关性研究较为深入。国外人群的全基因组关联分析(GWAS)提示HLA-DRB1和HLA-B基因外显子区的多态性与RA和SLE的发病风险相关。近年来研究发现,作为HLA抗原的受体,杀伤细胞免疫球蛋白样受体(Killer cell immunoglobulin-like receptors,KIR)通过调节NK细胞杀伤活性参与自身免疫病的发病。有报道RA患者中KIR3DL1基因频率低于正常人群,KIR3DL1可能通过与HLA-Bw4相互作用下调NK细胞杀伤活性抑制自身免疫性疾病的进程。KIR3DL1基因具有非常丰富的多态性,不同地区、不同群体间KIR3DL1等位基因的分布及其频率有独自的特征。由于自身免疫病的遗传异质性,自身免疫病与易感基因之间的关联性常常呈现出人群及地区的差异。在我国不同地区和民族中,有关KIR3DL1和HLA-B配体基因多态性分布特征的资料尚需补充,其在自身免疫病发病过程中的作用机制仍需进一步完善。本研究采用病例-对照关联研究的方法,在云南群体中进行RA、SLE相关基因的关联研究,探讨具有特定功能的KIR3DL1基因与自身免疫病的关联性,为完善自身免疫病的发病机制提供更多资料。[目的]本研究旨在探讨KIR3DL1基因多态性及其与自身免疫病的关联性。[方法]本研究采用PCR-SSP检测我国云南地区360例汉族和108例蒙古族、内蒙古地区48例蒙古族KIR3DL1功能性等位基因分布特征,并采用PCR扩增结合DNA测序法检测云南地区普米族、阿昌族、景颇族、傣族、蒙古族、汉族KIR3DL1基因序列多态性。在获得云南地区KIR3DL1基因多态性分布资料之后,采用PCR-SSP对云南地区270例RA患者、271例SLE患者和360例正常个体的KIR3DL1功能性等位基因分型。[结果]研究结果显示,在云南的蒙古族和汉族之间,低表达等位基因KIR3DL1*007的携带率分别为45.54%和30.55%,KIR3DS1*013分别为3.70%和23.89%,分布有显著差异;在云南和内蒙古的蒙古族之间,无表达等位基因KIR3DL1*004的携带率分别为7.14%和56.25%,低表达等位基因KIR3DL1*005分别为2.86%和25.00%,等位基因分布有显著差异;对云南地区不同民族KIR3DL1基因多态性检测发现4个新KIR3DL1等位基因(基因序列号为 KX187427、KX187428、KX187429、KX187430)。KIR3DL1基因内含子2区域中发现的4bp缺失在云南不同民族中的携带率分别为:普米族7.94%、阿昌族5.19%、景颇族2.38%、傣族6.32%、云南蒙古族2.33%、汉族8.24%。此外,在RA、SLE患者组和对照组中,低表达的KIR3DL1*005基因携带率分别为46.18%、42.22%、22.97%;低表达的KIR3DL1*007基因携带率分别为 18.88%、20.00%、30.53%;不表达的KIR3DL1*004携带率分别为 0.40%、4.44%、4.20;另外,女性类风湿性关节炎患者的HLA-B*40基因频率(8.84%)明显低于女性对照组(18.33%),HLA-B*51基因频率(9.53%)明显高于对照组(2.83%),HLA-B*48基因频率(0.23%)明显低于对照组(2.33%),差异均有统计学意义。HLA-B*40、B*51、B*48的基因频率在男性类风湿性关节炎患者和男性对照中的分布无统计学差异。另外,在携带HLA-B*40基因的RA病例-对照组中,*005基因携带率在病例组(82.50%)较对照组(16.98%)较高;在携带HLA-B*51基因的RA病例-对照组中,KIR3DL1*007/Kir3dl1*002携带率在病例组(11.80%)较对照组(50.00%)低。[结论]本研究发现,KIr3Dl1基因多态性在不同民族、同一民族不同地区之间的分布呈现明显的差异,不同民族KIR3DL1等位基因多态性分布特征与民族源流和环境选择因素相关。另外,KIR3DL1基因多态性与云南地区RA及SLE相关。其中KIR3DL1*005可能是RA和SLE易感基因,KIR3DL1*007可能是保护性等位基因,提示RA和SLE作为自身免疫性疾病,具有相似的致病因素;KIR3DL1*004可能是RA的保护性等位基因,而与SLE无关联性,提示RA与SLE具有不同致病机制。另外,HLA-B*51基因可能是RA的易感因素,HLA-B*40、HLA-B*48可能是RA的保护性因素。HLA-B*40和KIR3DL1*005组合可能是RA发病的危险因素,KIR3DL1与HLA-B结合多样性对RA发病的影响复杂多变,提示相比于单独分析HLA-B或KIR3DL1基因与RA的相关性,KIR3DL1受体结合HLA-B配体综合分析能更好的反映HLA-B和KIR3DL1对RA易感性的影响。