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论文基于神经生长因子(Nerve Growth Factor, NGF)及其信号通路,首先研究了人乳腺癌细胞系MDA-MB-231中NGF及其受体TrkA的表达情况,及其对乳腺癌细胞增殖和存活的影响,以及NGF对MDA-MB-231细胞作用的可能的信号通路；然后对作用于Ras不同位点的多肽适配体进行筛选,并进一步探索了有效多肽适配体的可能作用机制,以期得到治疗乳腺癌的潜在靶点。结果如下：1.运用免疫荧光法与酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测MDA-MB-231细胞中NGF的自分泌情况。结果显示MDA-MB-231细胞表达NGF并存在自分泌现象。2.通过单核细胞直接细胞毒性测定方法(mono-nuclear cell direct cytotoxicity assay, MTT)检测NGF拮抗剂Ro 08-2750对细胞活性的影响；通过5-溴脱氧尿核苷掺入法(5-bromodeoxyuridine, BrdU)检测细胞增殖情况,运用流式细胞仪分析细胞凋亡情况以及细胞周期分布的变化,运用细胞凋亡原位检测试剂盒(TUNEL)检测细胞凋亡情况。结果显示Ro 08-2750明显抑制细胞活性,并具有剂量效应,NGF能够拮抗这种效应；40μM Ro 08-2750可抑制细胞增殖率由25%降至10%；Ro 08-2750使S期细胞显著增加,G2／M期细胞显著减少,促进细胞进入凋亡程序,凋亡细胞约占总细胞数的9%。3.运用免疫荧光与蛋白质印迹(Western blot)检测NGF的高亲和力受体酪氨酸蛋白激酶A(tyrosine kinase A, TrkA)在MDA-MB-231细胞中的表达；通过MTT检测TrkA拮抗剂k252a对细胞活性的影响,运用PCR和Western blot研究信号通路蛋白的表达。结果表明MDA-MB-231细胞表达NGF受体TrkA, k252a可有效抑制细胞活性；Ro 08-2750刺激p53长时间转录,caspase-3及p21短时间转录,并增强Bax的转录；Ro 08-2750可以减弱MAPK与Akt磷酸化蛋白p-ERK1/2与p-Akt的表达,但能增强p53与Bax的表达。4.采用多肽适配体技术将6种能够特异性结合Ras蛋白不同位点的多肽适配体转染MDA-MB-231细胞,MTT法检测细胞转染后的活性,筛选出能够有效抑制细胞生长的适配体；通过PCR及Western blot探索有效适配体抑制细胞活性的作用机制。多肽适配体pPER 41R与pPER 105R能明显抑制细胞活性；pPER 41R与pPER 105R能够刺激细胞转录p53, Bax及caspase-3, pPER 41R能够显著减弱Akt1的转录,而pPER 105R也能减弱Akt1的转录,但作用没有pPER 41R明显；pPER 41R与pPER 105R能够彻底抑制MAPK与Akt的磷酸化蛋白p-ERKl/2与p-Akt的表达,但能增强p53与Bax的表达。研究结果表明：乳腺癌细胞系MDA-MB-231的增殖具有NGF依赖性,NGF能够促进MDA-MB-231细胞的生存。Ro 08-2750对MDA-MB-231细胞进行NGF剥夺后,细胞增殖受到抑制,出现细胞S期阻滞,G2／M期减少,细胞出现凋亡。在乳腺癌细胞系MDA-MB-231中,NGF很可能与其高亲和力受体TrkA结合后,通过上调p-ERK1/2与p-Akt蛋白的表达,下调p53与Bax蛋白的表达,,从而促进细胞增殖与存活。通过对结合Ras的多肽适配体的筛选,pPER 41R与pPER 105R可以有效抑制MDA-MB-231细胞的增殖与存活,这种抑制作用很有可能是由于p53与Bax表达的上调,以及p-ERK1/2与p-Akt表达的下调引起的。提示pPER 41R和pPER 105R具有突变Ras的抑制特异性,对于研究治疗乳腺癌的药物具有潜在的价值。