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目的：探讨HPV16E6对不同p53基因型的宫颈癌细胞生长增殖、凋亡及化疗药物敏感性的影响。方法：第一部分：通过脂质体法将HPV16E6基因稳定转染宫颈癌C33A细胞，RT-PCR及Western blotting分别检测转染细胞中HPV16E6mRNA和蛋白表达水平，MTT比色法及流式细胞仪检测HPV16E6基因转染对C33A细胞生长增殖与细胞周期的影响。第二部分：应用MTT比色法检测DDP、BLM、VCR、DDP+BLM+VCR对宫颈癌细胞生长增殖的影响；AO／EB染色结合荧光显微镜技术及Annexine V-FITC／PI双标法流式细胞仪检测不同浓度DDP干预前后宫颈癌细胞凋亡情况；Western blotting检测不同浓度化疗药物DDP干预后对HPV16E6和p53mt蛋白表达的影响：RT-PCR检测不同浓度DDP干预对各组宫颈癌细胞HPV16E6基因mRNA表达水平的影响。结果：第一部分：通过稳定转染获得了稳定表达pcDNA3-HPV16E6质粒的C33A细胞克隆（C33A-E6细胞）及稳定复制空载体质粒的细胞克隆（C33A-P细胞）。转染HPV16E6基因的C33A细胞的生长速度比空白对照组和C33A组明显加快（P＜0.05）。HPV16E6对C33A细胞生长增殖有促进作用。在转染了HPV16E6基因的C33A细胞中，其DNA合成前期G1和静止期G0（G0／G1期）细胞百分率（39.27％）明显低于空载体转染组（53.73％）和未处理的C33A细胞（55.38％）（P＜0.01）；而处于S期细胞的百分率（38.83％）、DNA合成后期G2及分裂期M的细胞百分率（G2／M：21.9％），均明显高于空载体转染组（S：29.36％；G2／M：16.91％）和C33A组（S：28.04％：G2／M：16.58％）（P＜0.01）。空载体转染组和未转染组细胞周期的各期分布无明显差异（P＞0.05）。第二部分：MTT结果显示，在相同作用时间，四组细胞均随着化疗药物浓度增大，细胞存活率逐渐下降，以10倍、5倍血药峰值浓度干预的各组细胞生长抑制最明显。10％、50％PPC及DMSO干预组细胞存活率均无显著性差异。200％、100％PPC干预组存活率明显低于10％与DMSO组。联合用药的细胞存活率显著低于单药干预组，而在DDP、BLM、VCR单药干预的各组细胞中，较多数据显示DDP干预组细胞的存活率明显低于BLM和VCR干预组，而BLM和VCR干预组之间无显著差异。在相同作用时间和相同剂量药物干预时，C33A-E6组细胞的存活率略高于C33A和C33A-P组，但仅少部分有统计学差异；C33A-E6与CaSki细胞比较存活率亦无统计学差异（P＞0.05），AO／EB染色和流式细胞术检测的C33A、C33A-E6、C33A-P、CaSki细胞随着DDP干预浓度的改变而凋亡率亦不同，80umol／L、8umol／L及0.8umol／L的DDP干预后各株细胞凋亡率均有显著性差异（P＜0.01），随着DDP剂量的增大，凋亡率亦明显增加。对于不同时间段比较，大剂量DDP即80umol／L干预组与DMSO干预组中各株细胞的24hr、48hr及72hr的凋亡率无明显改变；小剂量即0.8umol／L组凋亡率在干预48hr后至72hr凋亡率明显增加（P＜0.01）；中剂量即8umol／L组凋亡率在干预48hr即显著增加，但持续至72hr时后未明显增高；0.8umol／L组与DMSO组凋亡率无显著性差异。Western Blotting验证结果显示：C33A-E6和CaSki细胞中均能检测到HPV16E6蛋白的表达，但表达较弱，且随着化疗药干预剂量的增大及作用时间的延长，两组细胞总蛋白中HPV16E6的表达量均逐渐降低甚至难以检测到表达，而未干预的对照组C33A-E6和CaSki细胞中HPV16E6的表达量稍有增加，但差异无统计学意义（P＞0.05）；C33A和C33A-P细胞中均未检测到HPV16E6蛋白的表达。C33A-E6、C33A和C33A-P三组细胞中均检测到p53mt的表达，但随着DDP干预剂量的增大及作用时间的延长，三组细胞总蛋白中p53mt的表达量均无明显改变（P＞0.05）。通过RT-PCR检测不同浓度DDP干预C33A、C33A-E6、C33A—P和CaSki四组细胞24hr、48hr后HPV16E6基因mRNA表达的变化，在未予DDP干预的情况下，C33A-E6与CaSki细胞在24hr时HPV16E6 mRNA的表达量无差异，而在48hr时则C33A-E6细胞的HPV16E6 mRNA表达量显著高于CaSki细胞（P＜0.05），且两组细胞48hr的HPV16E6 mRNA表达均较24hr显著增高（P＜0.05）；在24hr和48hr两时间段内，随着DDP干预浓度的增加，两组细胞的HPV16E6 mRNA表达量均逐渐减少（P＜0.01）；但在同样浓度的DDP干预时，C33A-E6与CaSki的HPV16E6 mRNA表达量无显著性差异（P＞0.05）。结论：HPV16E6基因具有促进宫颈癌细胞生长增殖及凋亡的双重作用，p53mt对C33A细胞的生长增殖及对化疗药物的敏感性无明显影响，HPV16E6基因与p53mt对宫颈癌C33A细胞无协同促进增殖和凋亡的作用。HPVE6基因对宫颈癌细胞株化疗敏感性的影响与p53的活性状态(p53mt／p53wt)无明显关系。HPV16E6基因可能通过其他作用机制对C33A细胞的凋亡和化疗敏感性产生作用。