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目的:
在当前的临床器官移植中,由于各种免疫或非免疫的原因导致初次移植后移植物丧失其应有功能,进而造成需要再次器官移植的病例不断增多。但记忆性T细胞(Tm)的存在严重阻碍了再次移植后移植物的存活。如何提高再次移植术后移植物存活时间已成为器官移植领域中的热点。我们尝试在皮肤预致敏小鼠的二次心脏移植模型中,使用趋化因子RANTES单克隆抗体(Anti-RANTES)和FTY720的免疫抑制方案,减少Tm对移植物的浸润,延长移植物生存期,并探讨其中可能的机制。
方法:
皮肤预致敏小鼠4周后行同种异体心脏移植,根据用药治疗情况分成四组,对照组(不给药)、Anti-RANTES组(2mg/kg/d,qd,i.p.)、FTY720组(2mg/kg/d,qd,i.g.)、联合用药组(Anti-RANTE S+FTY720)。观察移植物生存时间、病理组织学改变、移植物和外周血中排斥反应相关的细胞因子(IL-2、IL-10、IFN-γ、TGF-β)表达量及各组药物对T细胞增殖能力的影响。
结果:
1、四个实验组的平均生存期(MST)分别为3.8天、4.6天、4.8天和10.2天。联合应用Anti-RANTES和FTY720可以显著延长移植物生存时间(P<0.001)。
2、在病理切片中,对照组移植物排斥反应病理评分3.62级,联合用药组0.50级,两者间存在显著统计学差异(P<0.001)。Anti-RANTES组和FTY720组移植物排斥反应病理评分分别为2.50级和2.62级,与对照组相比均存在统计学差异(P<0.05)。
3、移植物qRT-PCR检测显示:与对照组相比较,Anti-RANTES组和FTY720组移植物内IL-2表达量降低,TGF-β表达量升高(P<0.01)。联合用药组移植物内IL-2表达量显著降低(P<0.001),IL-10、TGF-β表达明显升高(P<0.001)。
4、ELISA试剂盒测试结果显示:与对照组相比较,Anti-RANTES组和FTY720组外周血中IL-2、IFN-γ表达量减少(P<0.05)。联合用药组外周血IL-2、IFN-γ表达量显著降低(P<0.001),IL-10表达量升高(P<0.05)。
5、在混合淋巴细胞反应中,与对照组相比较,Anti-RANTES组和FTY720组的T细胞增殖能力降低(P<0.01),联合用药组T细胞增殖能力显著降低(P<0.001)。
结论:
1、再次移植后单独应用Anti-RANTES或FTY720可以减少移植物中淋巴细胞的浸润,调节移植物和外周血中排斥反应相关细胞因子的水平,抑制T细胞增殖,延长移植物生存时间。
2、联合应用Anti-RANTES和FTY720可以显著减少再次移植移植物中淋巴细胞浸润,调节移植物和外周血中排斥反应相关细胞因子的水平,抑制T细胞增殖,并显著延长移植物生存时间。Anti-RANTES和FTY720之间可能存在一定的协同作用。