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目的：检测IGF-Ⅱ VEGF、D2-40在胆管癌中的表达,分析三者表达水平与胆管癌患者的性别、年龄、肿瘤的部位、分化程度、分期、淋巴结转移、组织器官转移之间的关系以及三者在胆管癌淋巴转移过程中的关系变化。方法：应用免疫组化链霉菌抗生物素-过氧化物酶(streptavidin peroxidase, SP)法分别检测50例胆管癌、50例癌旁组织、30例正常胆管组织中IGF-Ⅱ、VEGF、D2-40蛋白的表达情况,用SYBR Green实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction, FQ-PCR)技术分别检测50例胆管癌、50例癌旁组织、30例正常胆管组织中IGF-Ⅱ、VEGF mRNA的表达情况。结果：(1)胆管癌组、癌旁组织组、正常胆管组IGF-Ⅱ蛋白的阳性表达率分别为70.0%、42.0%、30.0%,胆管癌组IGF-Ⅱ蛋白的表达阳性率明显高于癌旁组织组和正常胆管组(P<0.05)；胆管癌组、癌旁组织组、正常胆管组VEGF蛋白的阳性表达率分别为90.0%、58.0%、53.3%,胆管癌组VEGF蛋白的表达阳性率明显高于癌旁组织组和正常胆管组(P<0.05)；胆管癌组、癌旁组织组、正常胆管组中D2-40标记的LMVD的值分别是12.23±2.68、4.56±1.02、2.45±0.98,胆管癌组LMVD明显高于癌旁组织组和正常胆管组(P<0.05)。(2)胆管癌组、癌旁组织组、正常胆管组的IGF-Ⅱ mRNA的相对表达量分别为[2.7884(2.2419,3.3145)]、[1.5436(0.9159,1.8713)]、[1-3805(1.0010,1.6912)],胆管癌组IGF-II mRNA的表达明显高于癌旁组织组和正常胆管组(P<10.05)；胆管癌组、癌旁组织组、正常胆管组的VEGF mRNA的相对表达量分别为[4.4462(2.7819,6.1296)]、[2.1290(1.5476,2.4501)]、[1.7385(1.3735,2.0853)],胆管癌组VEGF mRNA的表达明显高于癌旁组织组和正常胆管组(P<0.05)。(3) IGF-Ⅱ的表达与胆管癌患者的肿瘤分化程度、分期、有无淋巴结转移和有无组织器官转移差异有统计学意义(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤部位差异无统计学意义(p>0.05)；VEGF的表达与胆管癌患者的肿瘤分化程度、分期、有无淋巴结转移和有无组织器官转移差异有统计学意义(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤部位差异无统计学意义(P>0.05)；D2-40标记的LMVD与胆管癌患者的肿瘤分期、有无淋巴结转移和有无组织器官转移差异有统计学意义(PP<0.05),与性别、年龄、肿瘤部位和分化程度差异无统计学意义(P>0.05)。(4)胆管癌组织中IGF-Ⅱ蛋白和VEGF蛋白的表达呈正相关。(5) IGF-Ⅱ阳性组的LMVD高于IGF-Ⅱ阴性组(P<0.05)；VEGF阳性组的LMVD高于VEGF阴性组(P<0.05)；IGF-Ⅱ、VEGF共同表达阳性组的LMVD高于IGF-Ⅱ、VEGF共同阴性组(P<0.05),单一阳性组的LMVD高于共同阴性组(P<0.05)。(6)胆管癌组织中IGF-Ⅱ mRNA和VEGF mRNA的表达呈正相关。结论：(1)胆管癌组织中IGF-Ⅱ、VEGF表达增加,其阳性表达率与肿瘤分化程度、分期、有无淋巴结转移和组织器官转移有关,提示IGF-Ⅱ、VEGF与胆管癌进展、转移有关。(2) IGF-Ⅱ和VEGF表达增加共同参与胆管癌的侵袭性生物学行为。(3)胆管癌组织中D2-40标记的LMVD增高,与肿瘤分期、有无淋巴结转移和组织器官转移有关,且与IGF-Ⅱ和VEGF的阳性表达密切相关,提示IGF-Ⅱ和VEGF可能在促进胆管癌淋巴管生成、淋巴转移调节机制中存在协同效应。