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目的 探讨以survivin和VEGF为双靶点的siRNA转染对神经胶质瘤U251细胞的体外效应。方法分别合成针对survivin和VEGF的siRNA。培养胶质瘤U251细胞,用脂质体包裹survivin-siRNA和/或VEGF-siRNA并转染至U251细胞。实验共分5组：S组：转染survivin-siRNA,V组：转染VEGF-siRNA,SV组转染：survivin-siRNA+VEGF-siRNA,NC组：阴性对照(Negative Control,NC)转染无关序列-siRNA,BC组：空白对照(Blank Control,BC)转染空白脂质体。用荧光实时定量PCR和Western Blot分别检测转染后survivin及VEGF在mRNA及蛋白水平的表达。用CCK-8及流式细胞术分别检测U251细胞增殖和凋亡。结果1.通过荧光实时定量PCR和Western Blot检测结果显示：在转染siRNA48h后,S组和SV组的survivin mRNA和蛋白的表达均显著下调,与NC组、BC组比较有显著性差异(P<0.01),但两组之间无明显差别;S组,V组和SV组的VEGF mRNA和蛋白的表达均下调,但V组和SV组与S组相比在mRNA水平上有差异(P<0.05)。2.CCK-8检测：与NC组、BC组相比,S组、V组、SV组在转染24h、48h、72h后细胞增殖能力均显著降低(P<0.01),S组、SV组与V组相比具有统计学差异(P<0.05),且在转染后72h,双靶点组(SV组)与单靶点组(S组、V组)相比具有显著性差异(P<0.01)。3.流式细胞术检测结果显示：与NC组、BC组相比,在转染48h后,S组、V组、SV组细胞凋亡增加(P<0.01),且SV组与S组、V组相比变化明显(P<0.01)。结论1.用脂质体包裹的siRNA转染可下调U251细胞survivin及VEGFmRNA及其蛋白表达,使U251细胞增殖抑制,凋亡增加。2survivin及VEGF的双靶点基因下调可增强其效应。3.通过siRNA下调survivin基因,可下调VEGF mRNA及蛋白的表达,反之则否,考虑survivin可能为VEGF的上游靶点。