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本文对转基因大豆的第5代种子进行种植,对转基因大豆的农艺性状进行观察和分析;采用PCR法检测外源基因在大豆后代中的遗传稳定性及目的基因和抗性标记基因的分离情况。同时采用转基因大豆叶片对除草剂的敏感性来验证抗性bar基因的分离;采用凯氏定氮法、索氏提取法等方法来测定转基因大豆中蛋白质、脂肪等营养成份的含量,进而比较转基因大豆和非转基因大豆成份含量的异同。同时通过气相色谱分析,计算出含△<6>-fad基因的转基因大豆的油酸、亚油酸、γ-亚麻酸的含量。主要结果如下:
(1)转基因大豆经过数代的种植后,在20个转基因大豆株系中,有2个转基因大豆株系(TS824和TS825)只含有△<6>-fad基因而没有bar基因;有7个两转基因大豆株系(TS81、TS83、TS85、T87、TS814、TS816、TS818)只含有bar基因而没有△<6>-fad基因;有9个转基因大豆株系(TS88、TS89、TS810、TS813、TS815、TS816、TS817、TS819和TS820)既有△<6>-fad基因也有bar基因;TS82和TS86植株既没有△<6>-fad基因也没有bar基因。
(2)通过对转基因大豆和对照的农艺性状进行比较分析,结果表明:转基因大豆之间以及转基因大豆与对照之间的各种农艺性状都存在显著差异;
(3)测定了转基因大豆和对照的主要营养成分,结果表明:转基因大豆的蛋白质含量各株系与空白对照并不存在显著差异,TS82,TS89,TS810,TS813,TS814株系的水分与脂肪含量均与空白对照存在差异。只含有△<6>-fad基因不含bar基因的Ts824株系与空白对照在蛋白质含量,水分含量与脂肪含量上均不存在差异。TS824.的蛋白质,水分,脂肪含量分别为24.623%,8.320%,19.905%,而空白对照的蛋白质,水分,脂肪含量分别为23.130%,8.173%,20.447%。
(4)通过气相色谱分析,计算出含△<6>-fad基因的转基因大豆的油酸、亚油酸、γ-亚麻酸的含量,结果表明:含△<6>-fad基因的转基因大豆γ-亚麻酸的含量均远高于对照植株的含量,说明△<6>-fad基因在这些株系中稳定地遗传了下来,并且在大豆中得到表达。