阿霉素自乳化纳米粒子的制备

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现代药剂学认为纳米粒子这种新型药物载体具有广阔的应用前景。可是这种载体也存在制备工艺或生物安全性等问题。本研究在室温搅拌的条件下成功的制备了自乳化纳米粒子药物传递系统,避免使用有潜在毒性的溶剂或化合物,以广谱抗癌药物阿霉素(DOX)为包裹药物,以卵磷脂乳化,海藻酸盐包裹,CaC12固化,然后再包裹壳聚糖,从而制备出了载阿霉素自乳化纳米粒子。实验选择紫外可见分光光度法来检测阿霉素的含量,然后进行方法学的考察,测定这种方法的精密度和回收率。方法学考察的结果为高、中、低三个浓度下的日内精密度RSD值分别为0.90%、0.42和0.33%,日间精密度值RSD值为1.12%、0.78%和0.57%,回收率RSD值为1.41%。以包封率、载药量为评价指标进行单因素考察,确定对包封率影响较大的因素为阿霉素的浓度、海藻酸钠的浓度、CaCl2浓度和壳聚糖的用量,再进一步通过正交实验以包封率为评价指标优化处方,最终确定阿霉素浓度为1.0 mg/mL,海藻酸钠浓度为0.63 mg/mL,CaCl2浓度为2 mg/mL,壳聚糖浓度为0.1 mg/mL,搅拌速度为1200 rpm。进行处方重现性考察计算出阿霉素纳米粒的包封率是85.5±1.5%,载药量是5.15±0.65%。对阿霉素自乳化纳米粒进行了质量评价,考察自乳化的时间、粒子的形态、粒径的测定、体外溶出度试验等。自乳化在大概5 min时间完成,纳米粒子的外形呈圆形或者椭圆形,平均粒径为587 nm,体外实验显示144 h累计释放率达到90%以上。液体制剂不稳定,容易导致纳米粒子形态的变化、聚集,使其粒径增大、包封率降低,这些给药物的运输、贮存和临床应用带来了诸多的不便。因此我们将阿霉素自乳化纳米粒子液体制剂冷冻干燥而形成固体干燥粉末,来提高制剂的稳定性。研究筛选出以5%的蔗糖做为冻干保护剂,得到外观比较饱满,色泽均一,无花斑出现,再分散性较高的冻干粉。并进一步将冻干粉复溶后进行纳米粒子质量的评价,得出平均粒径为654 nm,透射电镜观察粒径形态为圆形,粒子边缘较光滑,包封率为81%,载药量为4.2%。由于临床上阿霉素对肝癌有很好的治疗作用,所以选择肝癌细胞株HepG2为实验模型,用赛唑蓝(MTT)比色法考察阿霉素纳米粒子对肝癌细胞的抑制作用。实验结果表明阿霉素自乳化纳米粒子对HepG2的抑制作用是具有时间依赖性和浓度依赖性的。
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