【摘 要】
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目的:通过观察大鼠心肌细胞低氧培养不同时间段的细胞蛋白激酶A(Protein kinaseA,PKA)活性与心肌细胞Na+通道基因SCN5A的表达情况,探讨低氧环境对心肌Na+通道基因表达及PKA活
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目的:通过观察大鼠心肌细胞低氧培养不同时间段的细胞蛋白激酶A(Protein kinaseA,PKA)活性与心肌细胞Na+通道基因SCN5A的表达情况,探讨低氧环境对心肌Na+通道基因表达及PKA活性的影响。
方法:将原代培养的大鼠乳鼠心肌细胞分为正常培养对照(5%CO2+95%空气)组和低氧(5%CO2+2%O2+93%N2)1 h、6 h、12 h和24 h组,用细胞PKA活性试剂盒检测各组PKA活性。用逆转录PCR、免疫细胞化学和蛋白印迹技术检测心肌细胞SCN5A基因在mRNA和蛋白质水平的表达。
结果:各组PKA活性:低氧1 h组和低氧6 h组高于正常组,低氧12 h组和24 h组低于正常组。SCN5A mRNA相对表达量与蛋白质表达量:低氧1h组和6 h组显著高于对照组;低氧12h组和低氧24h组显著低于对照组(RNA水平:P<0.01;蛋白质水平:P<0.05)。
结论:培养心肌细胞PKA活性与Na+通道基因SCN5A在低氧1 h和6 h mRNA和蛋白质表达均上调,而在低氧12 h和24 h mRNA和蛋白质表达均下调。且心肌细胞SCN5A基因的表达与PKA活性变化一致,PKA可能参与影响大鼠心肌细胞缺氧后膜上Na+通道α亚单位的表达。
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