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10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homologue deleted chromatosome10,PTEN)是一个具有磷酸酶活性的抑癌蛋白。PTEN能够通过拮抗PI3K/AKT、MAPK、FAK等多条信号通路,在抑制细胞生长、阻止细胞迁移、促进细胞凋亡等多种生理活动中发挥重要作用。多项研究指出PTEN在抑制多种癌症,特别是乳腺癌的发生、发展中具有重要意义。乳腺癌扩增因子1(amplified in breast cancer1, AIB1)是在乳腺癌中经常发生过表达的一种癌蛋白。AIB1的过表达和活化被认为与乳腺癌的发生、发展密切相关。因此本研究以PTEN和AIB1为研究对象,研究两者是否存在相关性。本论文的主要工作如下：1.我们首先检测了PTEN对AIB1蛋白水平的影响,发现PTEN下调了AIB1的蛋白水平,但是不影响AIB1的mRNA水平。进一步的研究结果表明PTEN能通过促进AIB1蛋白的泛素化降解进而下调AIB1的蛋白水平。但是要注意的是,野生型PTEN和磷酸酶活失活突变型PTEN (G129R)都能下调AIB1的蛋白水平,显示PTEN能以磷酸酶活性依赖或者非依赖方式调控AIB1的蛋白水平。2.因为PTEN(?)够抑制PI3K/AKT信号通路的激活,我们随后研究了PTEN调控AIB1蛋白水平的能力是否与PTEN抑制PI3K/AKT言号通路激活的能力有关。实验结果显示,当使用LY294002抑制PI3K/AKT言号通路的激活时,AIB1(?)蛋白水平发生下调；当使用AKT (E40K)质粒激活PI3K/AKT信号通路时,PTEN下调AIB1蛋白水平的能力受到抑制。因此这个结果表明PTEN能通过抑制PI3K/AKT通路的激活,以磷酸酶活性依赖方式调控AIB1的蛋白水平。3.我们使用PTEN的各截短型突变体,通过免疫沉淀实验,同时研究了PTEN和AIB1,以及PTEN和AIB1的泛素E3连接酶,Fbw7α之间的相互作用。结果表明PTEN通过磷酸酶结构域(PPase domain)和AIB1发生相互作用,同时通过C2结构域和Fbw7α发生相互作用。PTEN因此增强了AIB1和Fbw7α,之间的相互作用,随后导致了AIB1蛋白的泛素化降解。这显示PTEN能通过Fbw7α,以磷酸酶活性非依赖方式调控AIB1的蛋白水平4.我们进一步利用报告基因实验和Real-time PCR实验研究PTEN对AIB1转录活性和AIB1-ERα靶基因mRNA水平的影响。实验结果显示PTEN能以磷酸酶活性依赖或者非依赖方式抑制AIB1的转录活性,并下调AIB1-ERa下游靶基因如c-myc和ps2的mRNA水下。其中PTEN通过PI3K/AKT通路以磷酸酶活性依赖方式,而通过Fbw7α以磷酸酶活性非性依赖方式调控制AIB1的转录活性。5.最后,我们检测了一系列癌细胞系中PTEN和AIB1的蛋白水平,发现在乳腺癌细胞系中,PTEN和AIB1的蛋白水平呈现反向相关的现象；然后通过细胞集落形成、MTT以及流式细胞实验检测PTEN对AIB1促乳腺癌细胞增殖能力的影响,发现PTEN能抑制AIB1促细胞增殖的能力。本论文的研究将抑癌蛋白PTEN与癌蛋白AIB1联系起来,确定PTEN是AIB1的一个有效的负调控子,能通过AIB1抑制乳腺癌细胞的增殖,为PTEN抑制乳腺癌的发生发展提供了分子理论依据,有助于今后对乳腺癌的发生、发展过程进行深刻了解。