【摘 要】
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蚯蚓纤溶酶(Earthworm fibrinolytic enzymes)是近年发现的一种新型的溶解血栓物质,因其较好的纤溶和溶栓性能,有望将其开发成一种新型的溶栓注射剂,从而有可能弥补目前市场
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蚯蚓纤溶酶(Earthworm fibrinolytic enzymes)是近年发现的一种新型的溶解血栓物质,因其较好的纤溶和溶栓性能,有望将其开发成一种新型的溶栓注射剂,从而有可能弥补目前市场上溶栓药价格昂贵,副作用多等缺点.该文主要阐述了通过蛋白快速液相色谱(FPLC)技术纯化赤子爱胜蚓纤溶酶工艺的建立过程,并对纯化的纤溶酶做了部分性质和药理活性研究,从而为把蚯蚓纤溶酶进一步开发成注射剂奠定了基础.一般而言,盐析,有机溶剂沉淀,超滤等常作为蛋白质粗提手段,进一步精细纯化需要各种柱层析如分子筛,离子交换,疏水,亲和层析等.蚯蚓纤溶酶是一组同工酶,理化性质极为相似,常规分离所得产品很难达到所需纯度.通过制备型液相色谱,我们得到五种纤溶酶的同工酶,分别命名为EFE-1,EFE-2,EFE-3,EFE-4,EFE-5,纯度达电泳纯,产量和比活超过文献报道水平;性质研究表明EFE-1,EFE-2为糖蛋白,EFE-3,EFE-4,EFE-5为非糖蛋白.EFE-l,EFE-2为二聚体,分子量分别为:41.4kd,40.3kd,EFE-3,EFE-4,EFE-5为单体,分子量分别为28.1kd,29.7kd,30.5kd.药理活性研究表明,EFE有较好的溶栓活性.相同量的EFE-1,EFE-5溶栓效果分别约为尿激酶的3倍和4倍.
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