β-tubulin Ⅲ、ERCC1和TS在肺鳞癌中的表达及与化疗敏感性、预后的研究

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目的:  观察β-tubulin III、ERCC1和TS蛋白在肺鳞癌的表达水平,及其与肺鳞癌患者临床病理特征的关系,与化疗敏感性的相关性,并分析预后影响因素,探讨三者在肺鳞癌发生发展中的作用,为肺鳞癌的个性化治疗提供相应的理论支持。  方法:  1.选取通过病理学检查明确为肺鳞癌的住院患者的气管镜活检标本组织79例,同时选取通过病理学检查明确为肺正常粘膜的门诊患者的气管镜活检标本30例作为对照。采用免疫组织化学链霉抗生物素蛋白-过氧化物酶法(S-P法)分别对两组标本中β-tubulin III、ERCC1和TS蛋白的表达情况进行检测;入组的79位肺鳞癌患者均为初治患者,给予化学药物治疗,具体的治疗方法如下:给予“紫杉醇135mg/m2静滴d1+顺铂30mg/m2静滴 d2-4”方案化疗,连续输注4日,21天为一个周期,顺利给予两个周期的化疗。治疗结束后复查CT、彩超等,由肿瘤内科两名高级职称医师对入组的79位肺鳞癌患者的化疗疗效进行评估;统计学分析三种基因蛋白在两组中的阳性表达率、各基因蛋白之间有无相关性及与临床病理特征的关系;分析79例病人β-tubulin III、ERCC1和 TS三蛋白的表达和化疗敏感性的相关性,并进一步分析肺鳞癌患者的预后影响因素。  2.统计及分析方法:  应用 SPSS19.0软件包进行统计分析。各个相关因素的差异性比较采用卡方检验(三蛋白之间的关系采用Spearman等级相关性分析),各检验方法皆以P<0.05为差异具有统计学意义。各临床病理特征因素与肺鳞癌患者生存时间的关系分别采用乘积极限法(Kaplan-Meier)计算生存率和绘制生存曲线,并行对数秩检验(Logrank test);影响肺鳞癌总OS的多因素分析采用Cox模型回归分析。以P<0.05为差异有统计学意义。  结果:  1.β-tubulin III的阳性表达主要定位于肺鳞癌组织的细胞质或细胞膜内,呈现棕黄色颗粒。且本实验所纳入的所有病例中,共有79例肺鳞癌患者,β-tubulin III阳性表达者50例,阴性表达者共29例,阳性率为63.3%(50/79)。30例肺正常粘膜组织中,β-tubulin III阳性表达者7例,阴性表达者共23例,阳性率为23.3%。β-tubulin III在肺鳞癌组织中的阳性表达率(63.3%)明显高于正常肺组织中的表达率(23.3%),差异有统计学意义(P<0.05)。β-tubulin III表达与肺鳞癌患者的性别、年龄、吸烟史和分化程度无关,差异无统计学意义(P>0.05),但与临床分期有关,差异有统计学意义(P<0.05)。  2.ERCC1蛋白在肺鳞癌中的阳性表达主要定位于细胞核,其多数细胞核内有许多棕黄色的颗粒状物质聚集沉着。且本实验所纳入的79例肺鳞癌患者,ERCC1蛋白阳性表达者38例,阴性表达者41例,阳性率为48.1%(38/79);30例肺正常粘膜组织中,ERCC1阳性表达者2例,阴性表达者共28例,阳性率为6.67%。ERCC1在肺鳞癌组织中的阳性表达率(63.3%)明显高于正常肺组织中的表达率(6.7%),差异有统计学意义(P<0.05);ERCC1表达与肺鳞癌患者的性别、年龄、吸烟史、临床分期和分化程度无关,差异无统计学意义(P>0.05)。  3.TS蛋白在肺鳞癌中的阳性表达主要定位于细胞膜和(或)细胞质,其内可见棕黄色颗粒聚集沉着。且本实验所纳入的79例肺鳞癌患者,TS蛋白阳性表达者有37例,阴性表达42例,阳性表达率为46.8%(37/79)。30例肺正常粘膜组织中,TS阳性表达者4例,阴性表达者共26例,阳性率为15.4%。TS在肺鳞癌组织中的阳性表达率(63.3%)明显高于正常肺组织中的表达率(15.4%),差异有统计学意义(P<0.05);TS表达与肺鳞癌患者的性别、年?龄、临床分期和分化程度无关,差异无统计学意义(P>0.05)。  4.79例肺鳞癌患者的癌组织细胞中,β-tubulin III与ERCC1两者表达均为阳性25例,共阴性表达者16例,据 Spearman相关检验分析,相关系数r=0.050,P=0.662,P>0.05,二者之间无关联性;β-tubulin III与TS两者共阳性表达者23例,共阴性表达者15例,相关系数r=-0.022,P=0.848,P>0.05,两者之间无关联性;ERCC1与TS两者共阳性表达者13例,共阴性表达者32例,相关系数r=0.089,P=0.082,P>0.05,两者之间无关联性。  5.β-tubulin III在化疗有效的病人中阳性表达率为34.61%,而在化疗无效的病人中阳性表达率为66.04%,卡方检验P=0.008(P<0.05)统计分析显示其与化疗疗效呈明显相关性。ERCC1在化疗有效的病人中阳性表达率为46.15%,而在化疗无效的病人中阳性表达率为66.04%,卡方检验P=0.091(P>0.05)统计分析显示其与化疗疗效呈无明显相关性。TS在化疗有效的病人中阳性表达率为44.44%,而在化疗无效的病人中阳性表达率为67.31%,卡方检验 P=0.072(P>0.05)统计分析显示其与化疗疗效呈无明显相关性。  6.随访情况及总生存率:所有病例均首次接受化疗,随访截至2016年12月31日,随访时间为3~65个月,失访0例,随访率100%。全组79例肺鳞癌患者1、2、3年总生存率分别为62%、41%、27%,中位生存时间为20个月。单因素分析结果显示:患者的分化程度、临床分期、疗效均与肺鳞癌的预后有关(P<0.05);性别、年龄、吸烟史均与肺鳞癌的预后无关(P>0.05);β-tubulin III、ERCC1和TS蛋白表达对预后的影响:β-tubulin III表达与预后无关(P>0.05)。ERCC1表达、TS表达与预后有关(P<0.05)。多因素分析结果显示;分化程度、临床分期、疗效、ERCC1表达、TS表达为独立的预后因素(P=0.050、0.000、0.000、0.000、和0.001),其相关优势比OR值分别为1.994、5.237、3.452、5.759和2.429。分化程度每降1级,患者的死亡风险增加1.994倍;临床分期每降1级,患者的死亡风险增加5.234倍;疗效每降1级,患者的死亡风险增加3.452倍;ERCC1表达阳性患者的死亡风险是ERCC1表达阴性患者的5.759倍。TS表达阳性患者的死亡风险是 TS表达阴性患者的2.429倍。  结论:  β-tubulin III、ERCC1和TS在肺鳞癌组织中的高表达提示其对肺鳞癌的形成起着重要的指示意义,且β-tubulinIII的表达与肺鳞癌化疗敏感性相关,表明其可作为判定肺鳞癌化疗疗效的重要指标;患者的分化程度、临床分期、疗效、ERCC1表达、TS表达与肺鳞癌的预后相关,表明其可作为判定肺鳞癌预后的重要指标。
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