论文部分内容阅读
目的:卵巢癌(ovarian cancer)是女性生殖器官三大恶性肿瘤之一,其中上皮性肿瘤是最常见的病理类型,其发病率次于子宫颈癌和子宫内膜癌列居第三位,但致死率居妇科恶性肿瘤之首,严重威胁着妇女的生命和健康。在卵巢癌的早期阶段,患者常无症状且缺乏有效的诊断手段,大部分患者确诊时已处于疾病的晚期,经治疗后又因肿瘤的复发和化疗耐药,5年生存率仍低于30%。因此,解决早期诊断以及复发和化疗耐药等问题成为改善卵巢癌患者预后的关键。卵巢上皮性癌(Epithelial ovarian cancer,EOC)是一组高异质性肿瘤,其组织来源尚不明确。肿瘤干细胞(Cancer Stem Cells,CSCs)假说是近年来提出的新理论,认为肿瘤干细胞是存在于肿瘤组织中的一类细胞亚群,与正常干细胞相似,具有自我更新、多向分化潜能和无限增殖的特性,在肿瘤组织中所占比例极小,但却是肿瘤转移、复发和耐化学治疗的根源。Wnt信号转导通路参与胚胎的生长、发育过程,调节细胞的增殖、分化、运动及凋亡,并与干细胞的生长和肿瘤的发生发展密切相关,是一个在进化上高度保守的复杂信号体系。Wnt基因家族的成员较多,Wnt1基因是该家族中最早被发现的一种原癌基因,其编码的蛋白具有恶性转化作用。目前国内外研究发现,Wnt1蛋白是Wnt信号通路激活的重要参与者,还参与胚胎发育、器官形成等多种过程,其异常表达与人类多个系统发生的肿瘤有着密切的联系。富含亮氨酸重复序列G-蛋白偶联受体5(leucine-rich repeat-containing G protein-coupled receptor 5,Lgr5),又名GPR49,是Wnt信号通路的靶向基因,也是G-蛋白偶联受体家族的新成员,在大脑、脊髓、眼睛、毛囊、胃肠道及生殖器官等多种人体正常组织中呈散在表达。近几年研究发现,Lgr5可作为小肠、结肠、毛囊、胃和肾等成体组织的干细胞标记物,在多种肿瘤组织中过表达,为肿瘤干细胞的潜在标记物之一,表明Lgr5的过表达状态与肿瘤的发生有很大的关联。目前,关于Wnt1和Lgr5在EOC中的研究报道较少。本研究通过免疫组织化学法检测Wnt1和Lgr5蛋白在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达情况,并探讨其与临床病理特征的关系以及二者的相关性,为EOC的诊断、治疗和预后提供新的理论依据。方法:运用免疫组织化学PV法检测18例正常卵巢组织、18例良性卵巢上皮性肿瘤组织和38例EOC组织组中Wnt1、Lgr5蛋白的表达情况,并分析两因子与临床病理特征间的关系及两者的相关性。采用SPSS17.0统计软件进行数据统计以及相关性分析。计数资料采用Pearsonχ2检验或Fisher确切概率法,两等级变量间的相关性分析采用Spearman等级相关分析。所有检验均为双侧,以α=0.05作为检验水准,P<0.05为差异有统计学意义。结果:1 Wnt1蛋白主要表达于细胞浆,Lgr5蛋白主要表达于细胞浆和(或)胞膜,均呈棕黄色颗粒。在正常卵巢组织中,Wnt1和Lgr5蛋白主要表达于上皮细胞,阳性率均为11.1%。在良性卵巢上皮性肿瘤组织中,Wnt1和Lgr5蛋白表达于肿瘤细胞,阳性率分别为33.3%、27.8%。EOC组织中,Wnt1和Lgr5蛋白表达于癌细胞,阳性率分别为81.6%、76.3%。三组间Wnt1和Lgr5蛋白的阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05);二者在EOC组织中的阳性率均高于正常组织和良性肿瘤组织,差异均有统计学意义(P<0.05),但在正常组织和良性肿瘤组织中的阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。2 EOC组织中,Wnt1和Lgr5蛋白的表达与肿瘤组织学类型之间无明显相关性,但与肿瘤的分化程度、手术病理分期和淋巴结转移情况密切相关。Wnt1和Lgr5蛋白在浆液性囊腺癌、黏液性囊腺癌、子宫内膜样癌和透明细胞癌组织中的阳性率分别为90.9%/86.4%、75.0%/66.7%、50.0%、50.0%,差异均无统计学意义(P>0.05)。在高中分化癌(G1、G2)中的阳性率分别为62.5%、50.0%,在低分化癌(G3)中的阳性率均为95.5%,差异均具有统计学意义(P<0.05),提示随着肿瘤恶性程度的进展,二者的表达水平也逐渐增高。在Ⅰ/Ⅱ期组中阳性率分别为53.8%、46.2%,在Ⅲ/Ⅳ期组中阳性率分别为96.0%、92.0%,差异具有统计学意义(P<0.05)。在有淋巴结转移组中的阳性率分别为95.7%、91.3%,在无淋巴结转移组中的阳性率分别为60.0%、53.3%,差异具有统计学意义(P<0.05)。3经相关性分析发现,Wnt1和Lgr5蛋白在EOC组织中的表达呈正相关,相关系数rs=0.534,P=0.001,有统计学意义(P<0.05)。结论:1 Wnt1和Lgr5蛋白在卵巢上皮性癌组织中均为高表达,提示Wnt信号通路可能参与了卵巢上皮性癌的发生。2 Wnt1和Lgr5蛋白在卵巢上皮性癌组织中的表达与肿瘤分化程度、手术病理分期和淋巴结转移密切相关,提示Wnt1和Lgr5在卵巢上皮性癌的发展、浸润和转移过程中发挥重要作用。3卵巢上皮性癌组织中Wnt1和Lgr5的表达呈正相关,在卵巢上皮性癌的发生、发展过程中可能起协同作用。