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背景和目的横纹肌肉瘤（rhabdomyosarcoma,RMS）是一种恶性间叶源性肿瘤,是儿童和青少年最常见的软组织肿瘤,胚胎性横纹肌肉瘤（embryonal rhabdomyosarcoma,ERMS）为最常见的组织学类型,目前的治疗方法主要是采用基于危险度分层的多学科治疗,对于早期的患者,采取积极的治疗方法,预后尚可。但大多数患者因早期临床症状不明显,就诊时已处于中晚期,即使进行积极的治疗,生存率也不容乐观。因此,筛选与疾病进展有关的生物学标志物,寻找针对疾病治疗的潜在靶点对改善患者的生存率具有重大的意义。随着质谱技术的发展,蛋白质组学技术已经成为筛选疾病标志物最有前景的技术之一,定量蛋白组学通过是否需要同位素标记分为标记定量与非标记定量。相比标记定量技术,非标记定量蛋白组学技术Label-free具有样品不受限制、不需要标记、操作简单、实验周期短等优点。本实验采用Label-free蛋白质组学方法,筛选出ERMS的差异表达蛋白,通过查阅相关文献资料发现,差异表达蛋白HNRNPU参与多种恶性肿瘤的增殖过程,并且影响肿瘤的预后。因此我们将差异蛋白HNRNPU作为目标蛋白,运用免疫组织化学法观察其在正常横纹肌组织及不同危险度分层的ERMS组织的表达情况,并研究其与临床病理参数的关系,分析HNRNPU表达强度与ERMS预后的关系。方法1.收集郑州大学第一附属医院2021年2月至8月经穿刺活检证实为ERMS并行根治术的肿瘤组织和肿瘤旁横纹肌组织各3例,由上海中科新生命生物科技有限公司进行Label-free蛋白定量检测,筛选差异蛋白。查阅与差异蛋白相关的文献资料,挑选目标蛋白进行验证。2.收集郑州大学第一附属医院2015年2月至2021年11月经病理诊断为ERMS病理资料95例,收集2020年1月至2021年12月病理诊断为正常横纹肌组织病例资料26例。3.采用免疫组织化学法检测目标蛋白在正常横纹肌组织及ERMS患者组织中的表达情况。4.通过SPSS26.0软件进行统计学分析和绘图。检验水准α=0.05,P＜0.05差异有统计学意义。结果1.筛选ERMS组与正常横纹肌组织的差异蛋白中,显著高表达蛋白有8个,通过查阅文献资料,发现HNRNPU与肿瘤的关系密切,因此,挑选HNRNPU作为目标蛋白。2.95例ERMS患者中HNRNPU高表达63例（66.3%）,26例正常横纹肌组织中HNRNPU高表达3例（11.5%）,差异有统计学意义（χ2=24.705,P＜0.05）。3.HNRNPU在不同危险度分层的ERMS患者中表达强度不同。低危组、中危组、高危组强表达（3+）率分别为 7.0%（3/43）、29.6%（8/27）、64.0%（16/25）,组间比较均出现P＜0.05,差异有统计学意义。4.危险度分层（rs=0.609,P=0.000＜0.001）与HNRNPU的表达强度呈强正相关;肿瘤大小（rs=0.421,P=0.000＜0.001）与HNRNPU的表达强度呈中等正相关;IRS分组（rs=0.348,P=0.001＜0.05）与HNRNPU的表达强度呈弱正相关;肿块是否完整切除（rs=-0.262,P=0.010＜0.05）与HNRNPU的表达强度呈弱负相关;性别（rs=-0.083,P=0.425＞0.05）、是否化疗（rs=-0.064,P=0.537＞0.05）、年龄（rs=0.257,P=0.12＞0.05）与HNRNPU的表达强度无关。5.Kaplan-Meier生存分析方法显示:年龄、肿瘤大小、是否化疗、肿块是否完整切除、IRS分组、危险度分层、HNRNPU染色强度对ERMS患者的预后产生影响,性别与EMRS患者的预后无关。年龄（0-10岁）、肿瘤大小（≤5cm）、是否化疗（是）、肿块是否完整切除（是）、IRS分组（Ⅰ组）、危险度分层（低危组）、HNRNPU染色强度（1+）的患者平均生存时间明显长于年龄（＞10岁）、肿瘤大小（＞5cm）、是否化疗（否）、肿块是否完整切除（否）、IRS分组（Ⅲ+Ⅳ组）、危险度分层（高危组）、HNRNPU 染色强度（3+）（P 均＜0.05）。6.COX单因素回归分析显示,性别（HR=0.548,P=0.141＞0.05）不是ERMS的预后因素,年龄（HR=2.391,P=0.015＜0.05）、肿瘤大小（HR=2.201,P=0.027＜0.05）、是否化疗（HR=0.353,P=0.009＜0.05）、肿块是否完整切除（HR=0.426,P=0.047＜0.05）、IRS分组（P=0.005＜0.05）、危险度分层（P=0.000＜0.001）、HNRNPU染色强度（P=0.000＜0.001）是ERMS预后的危险因素。7.COX多因素回归分析显示:是否化疗（HR=0.276,P=0.005＜0.05）、危险度分层为ERMS的独立预后因素,其中高危组相对于低危组（HR=30.799,P=0.000＜0.001）为ERMS的独立危险因素。结论1.HNRNPU是ERMS的差异表达蛋白,在不同危险度分层中表达强度不同,危险度越高,表达强度越强,可作为评价患者预后的指标,但评判时应结合患者年龄、肿瘤大小、是否化疗、肿块是否完整切除、IRS分组及危险度分层。2.化疗及危险度是ERMS的独立预后因素。