轮枝孢菌素A (Verticillin A)属二酮哌嗪类化合物,本文从蘑菇黄赭鹅膏菌(含菌寄生菌歪孢菌)中分离提取得到轮枝孢菌素A,具有抗肿瘤转移活性。肿瘤细胞转移是制约肿瘤治疗的一大障碍,找到一种能够抑制肿瘤细胞转移的药物将具有非常重大的意义。本文研究了轮枝孢菌素A抑制结肠癌细胞迁移的分子机制,通过细胞划痕实验、Transwell跨膜迁移实验发现轮枝孢菌素A在体外能有效抑制结肠癌细胞迁移,接着通过PCR、Western Blot等试验筛选细胞迁移相关的关键基因,找出轮枝孢菌素A的作用靶点为c-Met。进一步研究发现,轮枝孢菌素A通过c-Met调节下游PI3K-Akt和Ras/Raf-MAPK信号,进而抑制结肠癌细胞迁移。此外,在分子水平,轮枝孢菌素A能够有效阻碍肝细胞生长因子HGF激发的c-Met磷酸化作用。通过Transwell实验模拟体内肿瘤细胞迁移过程也发现轮枝孢菌素A能够有效逆转HGF诱导的细胞迁移运动。BAL B/c小鼠体内试验发现,轮枝孢菌素A单药抑制结肠癌细胞CT26肺部转移的效果不是很明显,但与TF RAIL配伍使用后,则可以有效抑制肿瘤细胞转移,抑制率近50%。这种药物协同作用的分子机制目前还不清楚,有待进一步研究。概括起来,轮枝孢菌素A能够有效抑制结肠癌细胞迁移运动能力,并通过抑制c-Met的表达来下调下游PI3K-Akt 和 Ras/Raf-MAPK信号通路,进而抑制肿瘤细胞迁移。本研究首次揭示了轮枝孢菌素A抑制肿瘤转移方面的作用,为今后轮枝孢菌素A作为候选抗癌药物更深远的开发研究提供理论支持。