2型糖尿病大鼠血浆中艾塞那肽LC-MS/MS检测方法的建立

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药物大分子分析技术,在50年代的免疫荧光(IFA)和60年代的放射(RIA)性免疫分析技术发展之后,70年代初期建立了酶联免疫吸附测定法(ELISA)。艾塞那肽(Exenatide)为胰高血糖素样肽-1(GLP-1)类似物Exendin-4的人工合成品,由39个氨基酸组成,稳定性差。在实际应用中亟需建立一种快速精准的艾塞那肽分析方法。随着现代分析技术的发展,尤其对液质联用(LC-MS/MS)分析技术的不断的研究,为药物在体内代谢产物的分析鉴别提供了更简便,更快捷的分析方法。LC-MS/MS技术结合了液相色谱的高分能力和质谱提供的结构信息的功能,具有灵敏度高、选择性强的优势,尤其串联质谱(MS/MS or MS)表现更为出色。研究通过链脲佐菌素联合高脂高糖饮食建立2型糖尿病大鼠模型(T2DM),分别通过ELISA和LC-MS/MS检测样品中艾塞那肽含量,实验结果研究表明:与正常组相比较高脂高糖饲料喂养4周后模型组大鼠血清中FFA含量升高有统计学意义。联合STZ尾静脉注射72 hr后,与正常组相比较,模型组大鼠空腹血糖值显著升高,符合2型糖尿病特征。ELISA检测最低浓度下线为:781 ng/mL;LC-MS/MS检测最低浓度下线为10 ng/mL。所以LC-MS/MS检测2型糖尿病大鼠血浆中艾塞那肽含量更为精准。
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