论文部分内容阅读
第一部分活性同种心脏瓣膜制备与保存过程目的:探讨合适的活性同种心脏瓣膜制备与保存方法。方法:用兔子作为活性同种心脏瓣膜的供体动物,采集实验所需的心脏瓣膜,将供体心脏瓣膜进行一系列处理后深低温保存,保存时间大约为2周,对瓣膜进行组织学、破坏强度、组织含水量、热皱缩温度、MHC-Ⅱ抗体的检测。结果:试验供体的兔子心脏瓣膜切除过程中,主动脉瓣膜和二尖瓣整体都保持了结构的完整性;经过深低温保存2周后,瓣膜在生物力学各方面良好,深低温保存后瓣腆组织的内皮细胞有小部分脱落。HE染色显示少许的炎症反应,形念学可见剩余的内皮细胞呈现扁平单层排列,梭形或者多边形,典型的呈“铺路石”状改变;VG+ET显示内皮下暴露的弹力纤维与胶原纤维的排列整齐、均匀、有序,符合瓣膜的受力情况;免疫荧光标记MHC-Ⅱ分子相关抗原的细胞发出特异性的黄绿色荧光;DAPI复染的有核细胞均匀的发出蓝色荧光。结论:该种方法对瓣膜的制备和保存适用、简便、有效,为活性同种心脏瓣膜的制备和保存提供了有效的途径。第二步部分活性同种心脏瓣膜免疫排斥反应的研究目的:构建活性同种心脏瓣膜免疫排斥反应模型,并通过研究瓣膜的组织形态学、物理学、生物力学、免疫学特性,研究免疫排斥反应对瓣膜的影响,利用阿托伐他汀对瓣膜组织的MHC-Ⅱ分子表达的抑制作用,降低活性同种心脏瓣膜免疫排斥反应,减少由于免疫反应引起瓣膜的退化和钙化现象,延长心脏瓣膜移植后寿命。方法:取出经深低温保存后的心脏瓣膜,将16只实验组动物分成4组,分别把主动脉瓣环和二尖瓣环各一半埋置动物的皮下,实验组分别以1mg/kg、3mg/kg、6mg/kg阿托伐他汀灌胃,空白对照组同样方法给等量的生理盐水,给药4周,检测瓣膜的各项指标。结果:试验组和对照组动物伤口愈合良好,对照组皮下埋置的瓣膜包裹现象较实验组明显,瓣膜的组织形态学和MHC-Ⅱ抗体两项中试验组均明显好于对照组,其余各项指标的检测结果也有不同的差异,DAPI复染各组并无显著差异。结论:实验组与对照组相比,在免疫排斥和组织形态学方面都起到了保护的作用,阿托伐他汀对由MHC-Ⅱ分子引起的同种心脏瓣膜移植后排斥反应有抑制作用。