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目的在前期证实菊粉能够抑制酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)炎症的基础上,本研究进一步探讨菊粉经短链脂肪酸(Short-Chain Fatty Acids,SCFAs)和肝巨噬细胞(Mψ)亚型极化对ALD的相关抗炎作用机制。方法体内实验,将60只雌性C57BL/6J小鼠随机分为4组:阴性对照组(PF/CON),模型对照组(AF/CON),菊粉对照组(PF/INU)和菊粉干预组(AF/INU)。每组小鼠饲喂含或不含酒精的改良型Lieber-DeCarli流质饮食,干预6周后,收集粪便;水合氯醛麻醉小鼠,获取肝脏组织。采用气相色谱-质谱(GC-MS)方法检测各组小鼠粪便中SCFAs的含量;免疫组化观察小鼠肝脏中诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、精氨酸酶1(arginine-1,Arg-1)炎症因子的含量;流式细胞术分析小鼠肝脏M1 Mψ、M2 Mψ及M1 Mψ中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、M2 Mψ中白介素10(Interleukin 10,IL-10)炎症的变化;通过免疫印迹实验(western blot)验证各组TNF-α、iNOS、Arg-1、IL-10、Toll样受体-4(Toll-like receptor4,TLR-4)、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)、核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)等蛋白表达情况。体外实验,小鼠来源的巨噬细胞Raw264.7细胞系分别通过脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和IL-4刺激极化为M1和M2型巨噬细胞亚群,随后与菊粉体内干预差异的SCFAs(包括丙酸钠,丁酸钠和戊酸钠)共培养,通过流式细胞术检测M1 Mψ、M2 Mψ及M1 Mψ中TNF-α、M2 Mψ中IL-10炎症因子的含量;免疫荧光染色(IF)分析iNOS或者Arg-1的表达;ELISA检测细胞培养上清液中TNF-α和IL-10炎症因子的水平;通过western blot检测了经SCFAs体外处理后,M1 Mψ中iNOS、TNF-α及M2 Mψ中Arg-1、IL-10蛋白的表达。结果小鼠粪便中丙酸钠、丁酸钠和戊酸钠在AF/CON组中的含量显著低于PF/CON组,而菊粉干预能够显著提高ALD中的三种SCFAs的含量。组化结果显示,ALD喂食菊粉治疗后,肝脏中iNOS的水平降低,而Arg-1显著升高。流式细胞术检测结果表明,与PF/CON组相比,AF/CON组中肝脏M1 Mψ和M1 Mψ中TNF-α比例增加;但与AF/CON组相比,AF/INU组明显降低。菊粉干预后,AF/INU组肝脏M2 Mψ和M2 Mψ中IL-10的比例明显高于AF/CON组。western blot分析显示,在ALD中添加膳食菊粉后,Arg-1和IL-10水平升高明显,iNOS和TNF-α的水平降低,TLR4、MyD88和NF-κB蛋白表达也明显降低。在体外实验中,流式细胞术的检测结果表明经丙酸钠,丁酸钠和戊酸钠处理干预后M1Mψ和TNF-α的比例分别降低,与之相反的是,M2 Mψ和IL-10的比例升高明显。免疫荧光染色检测到丙酸钠、丁酸钠和戊酸钠均抑制了iNOS的活力,增强了Arg-1的表达;ELISA法检测证明丙酸钠、丁酸钠和戊酸钠降低了TNF-α水平,增加了IL-10的表达;western blot法验证了丙酸钠、丁酸钠和戊酸钠抑制了iNOS、TNF-α的表达,增强了IL-10、Arg-1的表达。结论菊粉通过改变小鼠肠内SCFA的浓度来影响M1-Mψ和M2-Mψ的极化,从而减轻ALD炎症。