论文部分内容阅读
目的:通过γ射线照射体外培养的正常人胃粘膜上皮细胞(GES-1),研究姜黄素能否通过上调Nrf2蛋白对放射性胃损伤起到保护作用,为胃的辐射损伤的治疗提供新的治疗方式。方法:实验选用体外培养的GES-1细胞,辐照剂量选用4Gy,观察时间为辐射后24小时。1.通过MTT法和MDA-TBA法分别检测单纯姜黄素组(5μM、10μM、20μM)及空白对照组,观察在单纯加入姜黄素后对细胞增殖及细胞内MDA浓度是否有变化;2.通过MTT法和MDA-TBA法分别检测对照组、辐照模型组、姜黄素(5μM、10μM、20μM)+辐照组、辐照+阳性药物(WR-2721)组,观察姜黄素是否具有辐射防护作用及细胞内MDA浓度变化;3.利用Western Blot法检测对照组、辐照模型组、姜黄素(5μM、10μM、20μM)+辐照组中Nrf2表达情况,观察姜黄素对Nrf2蛋白是否具有激活作用;4.通过加入Nrf2抑制剂(mL-385)验证Nrf2蛋白对细胞的保护作用。结果:1.在浓度5μM—20μM之间,姜黄素对GES-1细胞的活力无明显影响,对GES-1细胞内的MDA浓度无明显影响。2.在浓度5μM—20μM之间,辐射损伤的GES-1细胞在姜黄素处理后其细胞活力呈姜黄素浓度依赖性上升,且浓度为20μM时,达到了与阳性药物相似的作用(P<0.01)。3.在浓度5μM—20μM之间,辐射损伤的GES-1细胞在加入姜黄素处理后其MDA浓度呈浓度依赖性的下降(P<0.01)。4.在浓度5μM—20μM之间,辐射损伤的GES-1细胞在加入姜黄素处理后其Nrf2呈药物浓度依赖性的上升(P<0.01)。5.辐射损伤的GES-1细胞在姜黄素处理组中加入Nrf2抑制剂后细胞活力下降、MDA明显上升,但细胞活力仍较辐照模型组高(P<0.01)。结论:1.姜黄素上调Nrf2蛋白降低γ射线辐射损伤后GES-1细胞内氧自由基,保护细胞。