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目的:基底细胞癌(basal cell carcinoma,BCC)又称为基底细胞上皮瘤(basal cell epithelioma),是源自表皮或其附属器的皮肤恶性肿瘤,为最常见的皮肤恶性肿瘤之一。本病多见于老年人,好发于皮肤曝光区,尤其是面、颈部,而躯干部相对少见。目前,其病因及发病机制尚不清楚,研究发现长期日光曝晒、大剂量X线照射、接触砷剂、人类乳头瘤病毒感染、P53和PTCH基因突变等与其发生密切相关。由此可见,BCC的发生发展是基因和环境两方面因素共同作用的结果。近年来,WNT信号传导通路与人类肿瘤的关系是国际前沿的一个研究热点。WNT信号传导通路,是一个多环节、多作用位点的生长发育调控信号通路,在细胞内外多种因素的调控下,WNT通路精确地调节着动物的生长和发育,而当其影响因素发生变化使其活化过度或失调时,便会导致机体发育异常或形成肿瘤。WNT是一种细胞间分泌蛋白,通过与细胞膜上卷曲蛋白(Frizzled,Fz)受体家族的成员作用,将信号传至细胞内,通过胞质蛋白的一系列相互作用,能够使胞浆内β-catenin保持稳定并累积,进而入核与T细胞因子/淋巴样增强因子(T cell factor/lymphocyte enhancer factor,TCF/LEF)形成β-catenin-TCF/LEF转录复合体,并在有关辅助激活因子的协同作用下,最终激活WNT信号的下游靶基因从而诱发肿瘤。本实验旨在探讨WNT信号传导通路中的WNT1、β-catenin、TCF4等成分在BCC中的表达,从而进一步了解该通路在肿瘤发生过程中的转导及调控,有助于为临床诊断提供依据,为早期干预治疗提供方法。方法:皮损标本来源于2005年5月~2008年6月就诊于河北医科大学第四医院皮肤科和病理科的患者,结合临床表现、病理确诊为BCC和脂溢性角化病(SK)。选取32例BCC标本,其中男性20例,女性12例,年龄46~78岁,平均年龄53.36±7.95岁,病程1年~20年,平均5.45±1.89年。选取26例SK标本作为对照组,其中男性15例,女性11例,年龄38~71岁,平均43.35±6.12岁,其在年龄、性别上与BCC组患者无统计学差异。并对来自外科外伤患者切除的15例正常皮肤标本进行检测。取患者皮损区组织做常规组织病理分析,常规组织病理采用苏木精-伊红(H&E)方法,皮损区WNT1、β-catenin、TCF4的表达情况应用免疫组化链霉菌抗物素蛋白-过氧化物酶连接(SP)法,三个因子各自在BCC和SK中的表达结果分别采用两等级资料比较的Mann-WhitneyU秩和检验,根据三个因子在BCC中的表达结果,分别对其两两之间采用Spearman等级相关分析进行分析,应用SPSS13.0统计软件分析实验结果。结果:1组织病理检查结果真皮内可见大小不一、形态不等的瘤体,呈团块状或条索状。瘤体由基底样细胞组成,细胞胞质少,胞核较大呈圆形或长梭形,瘤体边缘的瘤细胞排列成栅栏状,瘤体周围基质内有明显的淋巴细胞浸润。2免疫组化结果:阳性染色为棕黄色颗粒2.1 WNT1的表达:WNT1阳性为细胞胞膜着色,在BCC皮损中,阳性细胞主要分布于癌巢中,其中强阳性20例,阳性5例,弱阳性3例,阴性4例。在26例SK皮损中,阳性细胞主要集中于异常肥厚的棘细胞层,其中强阳性2例,阳性8例,弱阳性7例,阴性9例。在正常皮肤中WNT1阳性着色主要位于皮肤附属器(毛囊),表皮基底层及棘细胞层则呈阴性表达;BCC组与SK组比较,表达强度明显增高,差异有显著性(Z=-3.908,P<0.01)。2.2β-catenin的表达:在正常上皮细胞中,β-catenin阳性细胞为胞膜着色,未见胞质和?或胞核着色。在BCC及SK皮损中,可见β-catenin在细胞膜表达减弱或缺失,并出现不同程度的胞质和?或胞核着色(即异位表达)。在32例BCC患者皮损中,28例出现β-catenin的异位表达,异位表达率为87.50%(28/32)。在26例SK患者皮损中,12例出现β-catenin异位表达,异位表达率为46.15%(12/26),经统计学分析表明,两者有显著性差异(Z=-4.343,P<0.01)。2.3 TCF4的表达:TCF4阳性为细胞核着色,少数瘤细胞呈胞质着色。在32例BCC皮损中可见强阳性19例,阳性8例,弱阳性3例,阴性2例。在SK皮损及正常皮肤表皮全层均呈现阴性表达。经统计学分析表明,BCC组与SK组比较,两者有显著性差异(Z=-6.615,P<0.01)。2.4 WNT1、β-catenin、TCF4表达的相关性分析:在BCC患者皮损中三者的表达强弱程度经Spearman等级相关分析结果显示;WNT1和β-catenin呈正相关;β-catenin和TCF4呈正相关;WNT1和TCF4呈正相关。结论:1 WNT1的表达水平在BCC患者皮损中明显高于对照组,提示WNT1表达水平上调可能参与了BCC的发生及发展。2β-catenin的异位表达率在BCC患者皮损中明显高于对照组,推测β-catenin的异位表达可能启动了下游的靶基因,使其激活,细胞周期发生变化,干扰了正常的细胞增殖和分化,诱发BCC的发生。3 TCF4的表达水平在BCC患者皮损中显著高于对照组,推测异位的信号可能激活了下游的癌基因,提示TCF4的高度表达可能与BCC的发病有关。4 BCC患者皮损中对WNT1、β-catenin、TCF4两两之间的相关性分析结果可推测:WNT1的高表达可能诱导WNT信号通路异常激活导致胞浆中的β-catenin发生异位表达,并与高表达的TCF4形成复合物,激活下游的靶基因,三者相互协同作用共同参与了肿瘤细胞的增殖、分化、侵袭、转移等过程。