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Hippo通路是调节器官大小和组织稳态的重要抑癌通路,该通路的异常激活与癌症的发生密切相关,包括乳腺癌、肝癌、结肠癌、肺癌等。哺乳动物中,Hippo通路的核心组成成分包括哺乳动物STE20样蛋白激酶1/2(mammalian STE20-like protein kinase 1/2,Mst1/2)、大肿瘤抑制基因1/2(large tumor suppressor 1/2,LATS1/2)、YES相关蛋白(yes-associated protein,YAP)和转录共激活PDZ结合域蛋白(transcriptional coactivator with PDZ-binding motif,TAZ)。YAP作为Hippo通路中关键效应分子,其翻译后修饰调控在Hippo-YAP通路的激活上发挥着重要作用,如YAP 127位丝氨酸(S127)的磷酸化修饰、109位丝氨酸(S109)的糖基化修饰,都参与调控YAP的进出核及Hippo通路下游靶基因的转录激活。但是迄今为止,关于YAP甲基化修饰的论述不多。精氨酸甲基化修饰是真核生物中如磷酸化和泛素化一样普遍存在的一种蛋白翻译后修饰,其作用极为广泛,且该类修饰的底物也包括大量组蛋白和非组蛋白。精氨酸甲基化修饰由进化上高度保守的一类精氨酸甲基转移酶(Protein Arginine Methyl Transferases,PRMTs)催化完成。在真核生物中精氨酸甲基化修饰的类型主要有三种:精氨酸单甲基化(ω-NG-mono-methylarginine,MMA),非对称精氨酸二甲基化(ω-NG,NG-asymmetric methylarginine,a DMA),和对称精氨酸二甲基化(ω-NG,NG-symmetric methylarginine,s DMA)。大量研究显示,精氨酸甲基化修饰的异常与多种肿瘤的发生密切相关。但YAP蛋白是否存在精氨酸甲基化修饰尚不清楚。在本研究中,我们通过质谱分析在分子水平上证实了YAP的124位精氨酸上存在着单甲基化修饰,该位点的甲基化修饰受到细胞所处的营养状况,如葡萄糖浓度的调控。为了探究YAP R124单甲基化修饰对Hippo通路的调控机制,我们从YAP S127磷酸化修饰入手,我们探究发现YAP R124单甲基化修饰抑制S127磷酸化修饰。在Hippo通路中YAP S127磷酸化修饰的转变是控制YAP进出核和下游靶基因转录的关键,我们进一步通过免疫荧光染色法和荧光实时定量PCR探究发现YAP R124单甲基化修饰可以促进YAP蛋白入核和Hippo通路下游靶基因转录。已有研究证明YAP在肺癌中是一个癌基因,与正常组织相比,在人肺癌组织中检测到YAP在细胞核中过表达。但是对于YAP是如何发挥其致癌功能我们还尚不清楚。因而我们在细胞水平上,通过MTS(3-(4,5-dimethylthiaol-2-yl)-5-(3-carboxy-methoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium,inner salt)和克隆形成实验证明了YAP R124甲基化修饰能够促进非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞的生长增殖和集落形成能力。综上所述,我们的发现YAP R124单甲基化修饰通过影响YAP S127磷酸化修饰,进而调控Hippo通路。并且在NSCLC细胞中,YAP蛋白上的精氨酸甲基化修饰能够促进H1299细胞增殖。本文初步论述了YAP蛋白上的精氨酸甲基化修饰对Hippo通路调控和对NSCLC细胞增殖的影响,发现了精氨酸甲基化修饰对Hippo通路调控的重要新机制,为进一步探索YAP精氨酸甲基化修饰作用的分子机制和疾病的治疗提供了新的思路。