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糖尿病周围神经病理性痛（diabetic peripheral neuropathic pain,DPNP）是糖尿病最常见的、严重的慢性并发症之一,严重影响糖尿病患者的生活质量。课题组前期研究已初步提出了通过“不引起明显痛感”温热刺激手段选择性激活痛觉内源性下行抑制作用,进而达到治疗疼痛的创新性理念及方法。本研究以大鼠后肢伤害性缩足反射为观察指标,深入探讨了肌肉内“不引起明显痛感”（43℃）温针刺激对糖尿病大鼠痛觉内源性下行调控作用的可能影响,及其对糖尿病早期及进展期大鼠伤害性反应的影响,同时在丘脑水平探讨了43℃温针治疗DPNP的中枢调控机制。目的:1.观察糖尿病早期及进展期痛觉内源性调控作用可塑性变化;2.探索43℃温针肌肉内刺激对早期糖尿病痛觉内源性调控作用的可能影响;3.探索43℃温针肌肉内刺激对进展期糖尿病周围神经病理性疼痛的可能疗效;4.探索43℃温针肌肉内刺激对糖尿病大鼠的血糖及体重的可能影响。5.探索43℃温针治疗DPNP的丘脑VM核团介导的中枢调控作用及机制。方法:大鼠腹腔注射不同剂量链脲佐菌素（Streptozocin,STZ,30 mg/kg,45 mg/kg及60 mg/kg）分别诱导糖尿病模型。观察大鼠造模前、2小时后、1-14天后血糖、体重及双侧后肢机械缩足阈值及热刺激缩足潜伏期。大鼠腹腔内注射STZ 45 mg/kg,造模后5天及12天,分别给予大鼠腓肠肌内43℃温针刺激30分钟,观察1-4小时及1天后双侧后肢的机械缩足阈值及热刺激缩足潜伏期。给予大鼠腓肠肌内注射25μl 2.5%福尔马林,腓肠肌内43℃温针刺激30分钟1天后再给予腓肠肌内注射25μl 2.5%福尔马林,分别观察福尔马林注射后1小时内的缩足次数、舔足时间及1-4小时、1天后双侧后肢的机械缩足阈值及热刺激缩足潜伏期的变化。此外,本实验观察了多次肌肉内温针刺激对血糖、体重和痛觉内源性下行调控作用的影响。建立糖尿病模型后12天,连续3天给予大鼠腓肠肌内43℃温针刺激30分钟,每天记录大鼠体重、血糖,并在温针刺激前后分别观察双侧后肢的机械缩足阈值及热刺激缩足潜伏期。丘脑VM核团内微量注射不同剂量5-HT7受体拮抗剂SB-269970,再次观察糖尿病大鼠肌肉温针刺激后的伤害性机械性和热刺激所诱发的缩足反射变化,探讨43℃温针刺激对糖尿病痛觉内源性下行调控作用的中枢机制。实验结果:1.建立糖尿病模型前各组大鼠体重、血糖、机械缩足反射阈值和热刺激缩足潜伏期无统计学显著差异（P＞0.05）。腹腔注射30 mg/kg STZ后大鼠血糖上升不明显,造模未成功。腹腔注射60 mg/kg STZ后,大多数动物因无法耐受过高的血糖而死亡,造模未成功。腹腔注射STZ 45mg/kg引起大鼠体重显著下降（注射后3-14天）,与缓冲液组相比差异显著（P＜0.05）;而血糖在注射后2小时明显升高,维持14天（P＜0.001）。同时,糖尿病组大鼠出现双侧机械性痛敏和热痛敏现象,并均持续6-14天。2.糖尿病早期:大鼠双侧机械性和热痛阈无显著变化。肌肉43℃温针刺激30分钟后,1-4小时及1天双侧机械性刺激缩足阈无显著变化（P＞0.05）,双侧热刺激缩足反射潜伏期延长（P＜0.05）,与对照组相比无显著差异。腓肠肌内注射25μl2.5%福尔马林诱发注射侧后肢持续的缩足反射,呈现为双时相反应:第1时相（0-10min）和第2时相（10-60 min）;糖尿病组大鼠各时相的肢体缩足次数显著高于对照组大鼠（P＜0.05）。肌肉注射福尔马林后的1-4小时及1天糖尿病组大鼠与对照组均出现双侧机械性痛敏,两组相比无显著差异（P＜0.05）;然而,对照组大鼠出现双侧热痛反应降低现象（P＜0.05）,糖尿病组大鼠的双侧热刺激缩足反射潜伏期无显著变化。肌肉内43℃温针刺激30 min后再肌肉注射福尔马林可以显著降低糖尿病组大鼠及对照组大鼠的自发反应第二时相的晚时相（30-60 min）肢体缩足次数,同时延长糖尿病组大鼠热刺激缩足反射潜伏期（P＜0.05）,但对双侧机械性缩足阈无显著影响。3.糖尿病进展期:大鼠出现双侧机械性痛敏和热痛敏现象。糖尿病组大鼠腓肠肌内注射25μl 2.5%福尔马林诱发的各时相肢体缩足次数均高于对照组大鼠;对照组大鼠出现显著的热痛反应降低现象（P＜0.05）,而糖尿病组大鼠热刺激缩足潜伏期无显著变化。肌肉内43℃温针刺激30 min可以显著改善糖尿病组大鼠机械性痛敏和热痛敏（P＜0.05）。此外,43℃温针刺激30 min显著降低了福尔马林肌肉注射诱发的第二时相的晚时相肢体退缩反应（30-60 min）,缓解了糖尿病组大鼠福尔马林肌肉注射引起的机械性痛敏,并显著延长了福尔马林肌肉注射后的热刺激缩足潜伏期（P＜0.05）。4.连续3天进行肌肉内43℃温针刺激30 min,对糖尿病组大鼠的体重、血糖无显著影响,第二次及第三次温针刺激对机械和热刺激缩足反射无显著影响（P＞0.05）。5.丘脑VM核团内微量注射不同剂量5-HT7受体拮抗剂SB-269970可以剂量依赖性地翻转43℃温针刺激引起的糖尿病组大鼠热痛反应降低现象（P＜0.05）。结论:1.45 mg/kg STZ腹腔注射可以成功建立大鼠糖尿病模型,糖尿病大鼠在6天以后出现机械痛敏和热痛敏现象,并可以持续至少14天。2.大鼠糖尿病早期,机械性和热痛阈无显著改变,但大鼠出现痛觉内源性下行易化作用增强,下行抑制作用减弱。43℃温针能够增强糖尿病大鼠痛觉内源性下行抑制作用,对伤害性机械刺激诱发的缩足反射没有影响。大鼠在糖尿病进展期出现机械性痛敏和热痛敏,同时痛觉内源性下行易化作用增强,下行抑制作用减弱。43℃温针可以显著增强内源性下行抑制作用,也可以显著抑制机械性痛敏。3.丘脑腹内侧核5-HT7受体参与43℃温针刺激引起的下行抑制增强作用。