基于荧光共振能量传递的纳米荧光探针制备及其对生物分子的检测

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近年来,荧光共振能量转移技术被广泛应用于检测、生物传感、生物成像、免疫分析等方面。本文以荧光共振能量转移为出发点,采用稀土掺杂上转换纳米材料和贵金属纳米材料分别作为能量供体和受体,设计并合成了两种不同类型的荧光纳米探针,并将其用于生物小分子的检测。利用SEM、XRD、TEM、荧光光谱仪、UV-Vis光谱仪及FT-IR等手段对样品的结构、光学性质、表面特性等进行了表征分析。本论文的内容主要分为以下三章:第一章总结大量文献及资料,介绍了本课题的相关研究背景、基本原理及方法、未来发展前景,并对基于荧光共振能量转移原理构建的荧光纳米探针的应用进行了详细论述。第二章探索出一种新的基于荧光共振能量转移原理的荧光纳米探针,首次将形貌为圆盘状、紫外特征吸收峰在紫光区的Ag纳米粒子和强紫光发射的NaYF4:Yb,Tm上转换纳米粒子通过静电吸引力结合,分别作能量受体和供体构建了荧光共振能量转移体系。该荧光纳米探针在不同pH环境以及不同盐离子存在下均具有高稳定性,同时对半胱氨酸具有高选择性,通过在荧光纳米探针的荧光强度与半胱氨酸浓度间建立线性关系,成功实现了对半胱氨酸的检测。第三章采用了一种简便的水热法制备了小尺寸、强紫光发射的NaYF4:Yb,Tm上转换纳米粒子,通过Stober法在其表面包覆了一层厚度均匀的SiO2壳层,并通过温和的表面修饰方法,使其表面连接上巯基。同时,由于多巴胺具有还原作用,故利用不同浓度的多巴胺溶液作还原剂制备了具有不同紫外特征峰的Ag纳米粒子,通过贵金属的比色法实现了对多巴胺的定性检测。接下来,我们利用Ag-S键化学作用力缩短了 SH-NaYF4:Yb,Tm@SiO2上转换纳米粒子与Ag纳米粒子间的距离,使两者成功构建了荧光共振能量转移体系,并且在该荧光纳米探针的荧光强度和多巴胺浓度间建立了线性关系,实现对多巴胺的定量检测。
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