【摘 要】
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目的通过缝合眼睑建立单眼实验性形觉剥夺性近视（Form-deprivation-myopia,FDM）动物模型,探讨球结膜下注射雷帕霉素对豚鼠形觉剥夺性近视的干预作用、相关机制以及对视网膜结构的影响。方法选用2～3周龄断乳健康花色豚鼠（购于山东西岭角生物公司）80只,性别不限,体质量150g～200g。裂隙灯检查排除眼部疾病后,使用随机数字法将豚鼠分为4组,即空白对照组、形觉剥夺性近视组（FDM组
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目的通过缝合眼睑建立单眼实验性形觉剥夺性近视（Form-deprivation-myopia,FDM）动物模型,探讨球结膜下注射雷帕霉素对豚鼠形觉剥夺性近视的干预作用、相关机制以及对视网膜结构的影响。方法选用2～3周龄断乳健康花色豚鼠（购于山东西岭角生物公司）80只,性别不限,体质量150g～200g。裂隙灯检查排除眼部疾病后,使用随机数字法将豚鼠分为4组,即空白对照组、形觉剥夺性近视组（FDM组）、雷帕霉素组、FDM+雷帕霉素组,每组20只;实验前使用带光检影镜检影测量屈光度、眼部A超测量眼轴长度。空白对照组不作任何处理;为不影响豚鼠正常觅食活动,仅对右眼进行实验,FDM组单纯缝合右眼眼睑;雷帕霉素组于实验开始的第1天、第7天分别右眼球结膜下注射雷帕霉素50μg;FDM+雷帕霉素组于实验开始的第1天、第7天分别右眼球结膜下注射雷帕霉素50μg后缝合右眼眼睑。记录各组实验前及实验开始的第1天、第7天的眼轴长度、屈光度;并取各组豚鼠眼球进行过碘酸雪夫氏染色（PAS染色）及视网膜透射电镜,观察FDM形成后视网膜形态变化以及雷帕霉素对正常视网膜形态的影响;取各组豚鼠进行Real Time-PCR测定巩膜组织的mTOR、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及转化生长因子β1（TGF-β1）mRNA的表达;利用Western Blot技术检测各组豚鼠巩膜组织中AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR的蛋白表达。结果FDM组和空白对照组相比,第7天、第14天豚鼠的右眼屈光度和眼轴长度增加,形成了相对近视;MMP-2、α-SMA的mRNA相对表达量均增加,TGF-β1的mRNA相对表达量减少,差异均具有统计学意义（均为P＜0.05）;mTOR的mRNA和AKT、P-AKT、mTOR、p-mTOR的蛋白相对表达量差异均无统计学意义（均为P＞0.05）;且视网膜变薄,各层结构排列变紊乱、疏松。雷帕霉素组和空白对照组比较,第7天、第14天豚鼠的右眼眼轴长度、屈光度差异均无统计学意义（均为P＞0.05）,且视网膜形态无影响。FDM+雷帕霉素组与FDM组相比,第7天右眼眼轴长度、屈光度差异均无统计学意义（均为P＞0.05）,第14天右眼眼轴和屈光度均减小,且差异均具有统计学意义（均为P＜0.05）;TGF-β1 mRNA的相对表达量增多,MMP-2、α-SMA、mTOR 的mRNA和AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR的蛋白相对表达量均减少,差异均具有统计学意义（均为P＜0.05）。结论形觉剥夺7天后便可诱导出相对近视;球结膜下注射雷帕霉素可延缓豚鼠形觉剥夺性近视的形成,可能是通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路、调节巩膜中的MMP-2、TGF-β1、α-SMA表达而发挥作用,且对正常视网膜结构没有影响。
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