【摘 要】
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背景:缺血再灌注(I/R)是急性肾损伤的主要病因之一,它引起一系列病理生理事件。活性氧簇(ROS)在I/R肾损伤中发挥重要作用,但其来源并不清楚。组织缺血诱导细胞内琥珀酸堆积参
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背景:缺血再灌注(I/R)是急性肾损伤的主要病因之一,它引起一系列病理生理事件。活性氧簇(ROS)在I/R肾损伤中发挥重要作用,但其来源并不清楚。组织缺血诱导细胞内琥珀酸堆积参与了再灌注期间ROS的生成。因此我们假设,琥珀酸堆积导致ROS产生和内质网应激参与肾I/R损伤。目的:验证是否存在琥珀酸脱氢酶(SDH)介导的琥珀酸堆积引起ROS生成参与肾I/R损伤。方法:Balb/C小鼠分为三组:对照组,I/R组,丙二酸二甲酯+I/R(DM)组。HK-2细胞进行低氧/复氧实验。质谱分析检测琥珀酸,生化检测血清肌酐尿素氮。免疫染色和Western Blot观察肾损伤分子1(KIM-1),琥珀酸脱氢酶(SDH),CCAAT/增强子结合蛋白(CHOP),葡萄糖调节蛋白-78(GRP78),3-硝基酪氨酸(3NT),超氧化物歧化酶(SOD)以及细胞色素C(Cyt C)的表达。DCFH-DA检测细胞ROS的生成。结果:DM预处理可以部分抑制I/R导致的小鼠肌酐尿素氮水平升高,也可以抑制I/R诱导的小鼠肾脏皮髓交界KIM-1,SDH,3NT,CHOP和GRP78表达增高。质谱分析显示琥珀酸在缺氧期间堆积,再灌注后降低。DM抑制SDH表达后抑制缺血缺氧导致的肾脏和HK-2细胞琥珀酸堆积,防止细胞缺氧复氧培养后出现的ROS产生,SOD降低,Cyt C释放和CHOP表达升高。结论:DM可能通过抑制SDH,减少肾脏缺血再灌注后ROS的产生,进一步防止细胞色素C释放和内质网应激蛋白CHOP表达增高,最终减轻肾I/R损伤。
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