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登革热是一种急性发热性传染病，主要通过蚊媒传播，它的病原体是登革病毒，该病毒有四种血清型（DENV1～4）。登革热的临床表现多种多样，既可表现为普通发热，也可发生致死性的重症。登革出血热和登革休克综合症等重症病例造成每年约20,000例患者死亡，成为影响发展中国家公共健康的一种重要疾病。在我国，登革热主要在沿海地区流行，其中以广东省最为严重，广东几乎每年都有登革热的报道。重症登革热病例病死率高，所以早期发现并对症治疗是救治重症登革热、降低病死率的关键。为了提高重症登革热的诊断成功率，世界卫生组织（World Health Organization，WHO）于2009年发布了新的登革热诊治指南，将登革热的临床分型修改为登革热和重症登革热两大类型，其中登革热又分为无预警征型和有预警征型，并将以下七个表现作为重症预警征(Warningsigns,WS)，包括腹部疼痛或压痛，持续性呕吐，临床血浆渗漏征，皮肤粘膜出血，极度乏力或烦躁，肝脏增大超过2厘米，伴随红细胞压积升高的血小板迅速下降等。该分型方案已在全球多个流行地区的登革热临床诊断中得到了初步应用，大多数研究认为它能较好地指导临床诊治工作，但对其适用性仍存在争议。在我国，这一新的分型方案尚未应用于临床，也未见相关的研究报道。因此，在我国人群中，探讨重症登革热的临床及实验室预警指标，对于制定适用于我国患者的登革热诊治方案、提高登革热的诊治水平具有重要意义，同时也将为WHO发表的新版登革热诊治指南提供有益的补充。迄今为止，登革病毒感染引发重症的原因尚不清楚，大量研究推测其与患者的年龄、性别和基础疾病等宿主因素有关。此外，异型登革病毒的二次感染也可能是导致重症登革热的重要原因。从临床资料、血清学和病毒学三个方面系统分析重症登革热患者病例,将为探寻重症登革热的发病机制和影响因素提供可靠的依据。研究目的1、总结我国登革热的临床及实验室特征，探讨重症登革热预警指标及2009年版的WHO登革热诊断标准在我国的适用性;2、分析我国首例重症登革热病例的临床及病原学特征，初步揭示重症登革热的发病机制和影响因素。研究方法1、回顾性分析1990～2012年广州市第八人民医院收治的登革热患者的临床及实验室资料,得到的数据用临床信息数据分析管理系统进行处理，并统计分析；2、回顾性分析一例重症登革热病例的临床及实验室检查的特征；3、采用酶联免疫法（ELISA）检测该病例发病期和恢复期血清登革IgM和IgG抗体，并用蚀斑减少中和试验检测其发病期及恢复期血清中针对不同血清型登革病毒的中和抗体水平。依据抗原原罪现象，确定该病人初次感染的登革病毒血清型；4、采用WHO推荐的nested RT-PCR法扩增该病例急性期血清中登革病毒的C-prM基因片段，确定其血清型。通过将C-prM基因序列在GenBank中进行Blast比对，确定与该基因同源性最高的登革病毒序列，根据该序列，采用PCR DESIGN软件设计扩增E基因片段的引物，采用RT-PCR法扩增该病例急性期血清中登革病毒的E基因片段，根据E基因序列，利用Neighbor-Joining法对该病毒株和其他29株DENV-1进行系统进化分析，确定该病毒的来源。结果1、1990年～2012年广州市第八人民医院共收治了1896例登革热患者，其中年龄超过18岁者1647人，占88.3%。诊断为普通登革热者1890例，诊断为登革出血热者5例，诊断为登革休克综合征者1例；按WHO2009诊断标准，诊断登革热者1262例，诊断为伴预警征的登革热者496例，诊断为重症登革热者138人。138例重症登革热中，出现休克者18例（13.0%），出现体液渗出并呼吸抑制者6例（4.3%），出现严重出血者77例（55.8%），出现谷丙转氨酶或谷草转氨酶升高超过1000U/L者5例（3.6%），出现意识障碍者4例（2.9%），出现心肌炎者31例（22.5%），出现肾功能不全者11例（8.0%）。2.全部病例中有634例次出现过重症预警征，最常出现的重症预警征为：重度乏力(28.5%)、液体渗出征(15.7%)和皮肤粘膜出血(27.1%)，特异性大于90%的WS包括腹痛(97.3%)、肝脏增大(99.8%)、伴随红细胞压积升高的血小板减少(99.5%)；3、我们此次报道的国内首例确诊重症登革热的病例是一位68岁的女性，她有糖尿病及高血压病史多年，此次发病后，出现发热、乏力、头痛、全身关节痛，并出现皮肤注射部位瘀斑和消化道出血表现。检查发现她的白细胞和血小板计数明显下降，肝肾功能损害明显，白蛋白降低，B超检查发现胆囊壁增厚。4、病毒学检测结果显示该重症病人此次感染的登革病毒为DENV-1,属于基因I型，与东南亚流行区的DENV-1同源性最高。5、血清学检测结果表明该重症病人为登革病毒二次感染，其初次感染的登革病毒为DENV-2。结论1.在本组1896例病人中，符合重症登革热诊断者138例，与临床表现的严重程度较相符，证明2009年WHO登革热诊断指南较适合我国临床应用。腹痛、肝肿大、体液外渗征、红细胞压积升高伴血小板计数减少等是重症登革热的特异性预警征。2.老年、女性、合并糖尿病和高血压、以及登革病毒二次感染是本例登革热发生重症的主要因素。腹部彩色B超检查胆囊壁厚度可能可以作为早期诊断重症登革热的指标。