【摘 要】
：
目 的用乳鼠骨片法分离鼠骨髓间充质干细胞(mouse bone marrow mesenchymal stem cells,mBMSCs),检测成骨生长肽(osteogenic growth peptide 10-14,OG P(10-14))干预对mBMSCs成骨分化的诱导作用及其对细胞增殖中细胞周期cyclin B1/CDK2途径的影响,以期为OGP(10-14)在临床治疗骨损伤提供依据。方
论文部分内容阅读
目 的用乳鼠骨片法分离鼠骨髓间充质干细胞(mouse bone marrow mesenchymal stem cells,mBMSCs),检测成骨生长肽(osteogenic growth peptide 10-14,OG P(10-14))干预对mBMSCs成骨分化的诱导作用及其对细胞增殖中细胞周期cyclin B1/CDK2途径的影响,以期为OGP(10-14)在临床治疗骨损伤提供依据。方 法无菌分离3日龄BALB/c乳鼠mBMSCs,用流式细胞术鉴定培养第3代的mBMSCs表面标记分子CD29、CD90、CD45和CD11b/c。实验分为对照组和成骨生长肽组(OGP(10-14)组),对照组:成骨诱导培养基(0.1μmol/L地塞米松、10mmmol/Lβ-甘油磷酸钠、50μmol/L 维生素 C、0.1μmol/L 谷氨酰胺、10%FBS、1%双抗),2～3d换液一次,诱导14d,OGP(10-14)组:成骨诱导培养基(同对照组)和1 0-5mol/LOGP(10-14),2～3d换液1次,诱导14d。采用MTS法检测诱导24h、48h和72h mBMSCs细胞增殖水平,茜素红染色检测诱导第7d和14d mBMSCs成骨分化情况,qPCR法和Western blot法检测mBMSCs成骨重要因子β-catenin、RUNX2、BSP 和周期相关因子 cyclin B1、CDK2、c-Myc mRNA水平及蛋白表达量。结果1、原代mBMSCs培养第三代细胞形态较为均一,呈长梭形,有漩涡状融合。流式细胞仪检测mBMSCs表面标记分子,结果显示mBMSCs高表达CD29(90.3±7.5)和 CD90(82.5±8.4),低表达 CD45(3.6±0.4)和 CD11b/c(5.8±0.9)。2、MTS结果显示,OGP(10-14)能显著促进mBMSCs增殖,在培养24h、48h及72h时其增殖水平明显高于对照组(t=3.505,P=0.039;t=6.940,P=0.006,t=6.803,P=0.007)。3、茜素红染色结果显示,在成骨诱导培养基的诱导下,对照组和OGP(10-14)mBMSCs向成骨分化,部分细胞呈聚集生长,集落状,随诱导时间的延长,出现红色层状矿化结节。OGP(10-14)组mBMSCs矿化结节较比正常组有所增加,提示OGP(10-14)促进mBMSCs向成骨分化。4、qPCR和Western blot结果表明,与对照组相比,OGP(10-14)提高β-catenin、RUNX2 及 BSP mRNA 水平(t=6.224,P=0.008;t=4.985,P=0.016;t=5.560,P=0.012),促进蛋白表达(t=7.053,P=0.006;t=8.927,P=0.003;t=8.580,P=0.003)。与对照组相比,OGP(10-14)组cyclin B1,CDK2和c-Myc mRNA水平明显提高(t=8.917,P=0.003;t=6.407,P=0.008;t=6.196,P=0.009),蛋白表达有不同程度增加(t=10.821,P=0.000;t=8.200,P=0.004;t=7.181,P=0.006)。结论OGP(10-14)通过Wnt/β-catenin信号促进BMSCs向成骨分化,并触发细胞周期cyclin B1/CDK2途径促进mBMSCs增殖,进而增加骨形成。
其他文献
随着人们生活水平的提高,对生活的品质要求越来越高,茶叶的需求量越来越大,但是现在茶叶采摘主要靠手工采茶,市场上存在劳动力不足以及劳动力成本高等问题,所以使用机器人实
重金属,作为一种普遍存在的环境污染物,会给食品安全造成极大隐患,是需要严格控制的食品污染物,因此对食品固体样品中的重金属离子进行检测分析非常重要。在对食品固体样品中
金山店铁矿极软矿岩包括粉矿、矽卡岩和破碎状膨胀岩。在极软矿岩地段掘进采准巷道的成巷问题一直是制约矿山生产、安全和经营的关键因素。本着以矿山现有施工技术基础、并对施工质量进行严格管控的研究思路,开展成巷关键技术研究。本文开展了广泛的现场监测和试验工作,分析影响成巷的主要因素。以主要影响因素为切入点,进行了专项研究工作,取得一系列有价值的成果,主要研究成果如下:(1)影响喷射混凝土强度的主要因素是拌和
功率放大器根据功率器件工作方式的不同分为线性功率放大器和数字功率放大器,传统的线性功率放大器功率器件工作在放大区,失真小但是损耗大效率低,不适合应用在大功率场合,数字功率放大器功率器件工作在开关区,损耗小效率高但是输出精度低,不过随着宽禁带功率器件与数字芯片的发展,数字功率放大器的性能得到不断提升。目前数字功率放大器在磁悬浮轴承,光伏发电等应用领域均需要双向电流输出,所以开展双向数字功率放大器的研
目的观察免疫检查点抑制剂联合中药治疗晚期恶性肿瘤患者的临床疗效及免疫相关不良反应(immune-related adverse events,ir AEs)。方法选取2018年4月2020年1月期间在安徽医科大学第一附属医院中西医结合肿瘤科接受免疫检查点抑制剂联合中药治疗且疗程在4周期以上分期为Ⅳ的恶性肿瘤患者,进行回顾性研究,观察中医症候及临床疗效,总结ir AEs的类型、发生率、等级及发生中
由于近年全球变暖以及石油资源日益短缺,国家大力推广绿色物流理念,同时也因为电动车电池技术的发展,很多电商与快递企业(如顺丰、京东等)已经使用电动车进行城市配送。与此同时,由于快递行业竞争压力增大,很多公司推出“限时物流”服务来提高其企业核心竞争力。对于电动车来说,车辆行驶过程中电量消耗除了与行驶距离相关外,还受车辆载重因素影响。基于上述背景,本文对考虑车辆载重的带时间窗电动车路径规划问题进行研究。
塑壳断路器是电路网络中一种十分重要的保护原件。传统的塑壳断路器通常由热金属片变形实现保护,却很难实现过载、长延时和瞬时保护的三段保护功能。智能化塑壳断路器除了能
背景:胃癌是全球消化道最常见的恶性肿瘤之一,是导致我国癌症相关死亡的第二大病因。我国是胃癌高发国家,发病与死亡病例约占世界的50%,每年估计有67.9万确诊病例和48.8万死
精神类药品指的是那些可以直接作用于大脑中枢神经系统,并使之兴奋或抑制的药品,连续使用精神类药品会产生一定的依赖性并会对使用者造成身体上和精神上的损害。当今世界,精神类药物滥用事件已是国际性关注的大问题。近年来,随着国际毒品的泛滥和新型毒品的迅速蔓延,在这样的环境下,吸毒模式由原来的单一吸毒转变为目前的多药滥用模式。氯胺酮(KET)和咖啡因(CF)是典型的混合滥用的精神类药物,这两种药物相互使用可能
目的肺癌的病理分期,尤其是淋巴结转移状态,对于肺癌患者的预后具有重要指示作用。多项研究结果表明,跳跃性N2转移的非小细胞肺癌患者相较同期别的序贯N2转移患者具有较好的预后。本研究旨在分析本中心非小细胞肺癌跳跃性N2转移患者的临床、病理特点,以期指导肺癌手术治疗的临床决策。方法回顾性研究2017年1月至2018年5月北京协和医院胸外科诊治的120例N2转移的非小细胞肺癌患者的病例资料,并对患者进行生