研究背景： 口腔扁平苔藓(oral lichen planus，OLP)是一种口腔多发的慢性炎症性粘膜疾病，在成人中发病率为1～2％，女性多见。由于OLP较正常组织有较高的细胞更新，有2％～3％的机率转变为口腔鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma of the oral cavity，OSCC)，WHO将其定义为癌前状态。尽管有许多研究，OLP的发病机制仍不十分清楚，但是自身免疫和凋亡被认为与它的发病有密切关系。 p53基因足广泛存在的肿瘤抑制基因，p63和p73是p53家族的另外两位成员，它们在基因排序和结构上有较大的同源性，都能激活p53相关靶基因，引起细胞周期停滞及细胞凋亡。但进一步研究发现，它们的结构和功能与p53相比，并不完全相同。有研究证明p63参与外胚层发育，是口腔粘膜、唾液腺、牙齿和皮肤发育所必需的，主要表达于鳞状上皮源性的恶性肿瘤中，在鳞癌的分化和发展上亦发挥作用。在两个不同肩动子的调控下，p63可以编码TAp63和△Np63两类转录产物，TAp63可协同p53蛋白的功能，△Np63可拮抗p53蛋白的功能，不同的异构体蛋白之间还存在着不同的相瓦作用。与p63类似，p73也可以编码TAp73和△Np73两大类异构体，各白发挥不同的转录作用。在正常组织中p73低表达，在大多恶性肿瘤中p73则有高表达，并且在TAp73异构体占优势的细胞中，p73将协同p53诱导细胞凋亡，而在ANp73异构体占优势时，p73将拮抗p53的诱导凋亡。随着对p73各种亚型逐步深入研究，目前发现△Np73对细胞生长和凋亡其实具有双重调节作用。在OLP组织中，p53表达水平较正常组织高，其表现的高突变率解释了OLP具有癌变的可能性，p53明显高表达对诊断该OLP患者有高风险发展为痛还具有实际性意义。p63、p73作为p53家族的另外两位成员，对于它们在OLP的发生、发展及预测癌变风险中的作用和彼此之间的关系，有必要进行大量实验研究。 实验目的： 通过检测不同分型OLP和OSCC中p63、p73基因及蛋白的表达，分析p63、p73基因及蛋白与OLP病情发生与发展的关系及其在OLP发生癌变机制中的作用，并探讨p63、p73是否可作为一种标志物预测OLP的转归。 材料与方法: 1.采集标本：口腔扁平苔藓20例(糜烂萎缩型10例，非糜烂型10例)；口腔鳞状细胞癌20例(高分化10例，中分化5例，低分化5例)；口腔正常粘膜组织10例。 2.实验方法及观察指标： (1)用免疫组织化学方法检测p63、p73在3组实验组中的蛋白表达，应用Image-Pro Plus 5.0软件计算阳性细胞的积分光密度(integrated option density，IOD)值，将表达强度量化进行半定量分析。 (2)用逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase polymerase chain reaction，RT-PCR)分析TAp63、△Np63、TAp73和△Np73在3组实验组中的RNA水平，采用Photoshop软件将RNA水平量化为灰度值(grey level)，取其与相应β-actin的灰度值的比值进行比较。 3.统计方法：数据运用SAS 10.0统计软什包进行统计学分析。 结果: 1.p63蛋白在正常组、OLP组和OSCC组中均有表达，OLP组表达下调，OSCC组表达上调，其中OSCC组表达上调与组织分型负相关，组间差异有统计学意义。 2.p73蛋白在正常组低表达，在OLP组和OSCC组表达上调，OSCC组表达明显高于OLP组，且与组织分型负相关，组问差异有统计学意义。 3.在糜烂萎缩型OLP中，p63阳性表达高于非糜烂型，差异有统计学意义；而p73在两者中无统计学差异。 4.在OLP组中TAp73和△Np73的RNA水平比正常组明显上调，组问差异有统计学意义。 5.在OSCC组中TAp63的RNA水平下调，△Np63、TAp73和△Np73的RNA水平上调，与其他两组间差异有统计学意义，其中△Np63的改变与组织分型负相关。 6.在糜烂萎缩型OLP中，TAp63 RNA水平低于非糜烂型，△Np63 RNA水平高于非糜烂型，两类型问差异有统计学意义。 7.TAp63／△Np63在三组实验组都有负相关关系；p63／p73在OLP组、OSCC组及△Np63／△Np73、TAp73／△Np73在OSCC组有正相关关系。 结论: 1.p63、p73可能与OLP的发病机制有关。 2.p63、p73特别是△Np63和△Np73可能与OSCC的早期形成和发展有关，其表达高低可以作为鳞状上皮分化程度的标记物。 3.p63、p73可能与OLP癌变机制有关，p63可能可以作为预测OLP是否有高风险癌变的指标，p73则不能。 4.p63与p73功能既互相独立又互相补充，特别是△Np63和△Np73，在OLP的发生、发展及癌变过程中可能存在协同作用。