鸡传染性支气管炎病毒(M41株)血凝抑制试验抗原的研制及应用

来源 :中国兽医药品监察所 | 被引量 : 5次 | 上传用户:lyt7913
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目前,我国鸡传染性支气管炎灭活疫苗产品的效力检验方法为血清学方法(HI试验),但国内尚无质量可靠的商品化血凝抑制试验抗原(以下称HI抗原),给该类产品的质量控制带来严重影响。为此,本课题开展了鸡传染性支气管炎病毒(M41株)HI抗原的研制及其在灭活疫苗效力评价上的应用研究。将鸡传染性支气管炎病毒(M41株)接种10日龄SPF鸡胚,37℃孵化36h后无菌收集尿囊液,经5000g离心40min,30000g离心2h进行100倍浓缩,浓缩病毒液用10%~20%的A型产气荚膜梭菌培养液上清37℃处理2~2.5h后,成功制备了鸡传染性支气管炎病毒HI抗原。按筛选的工艺制备并冻干了3批HI抗原,3批冻干抗原的血凝效价达到8-10log2。使用荷兰GD公司进口HI抗原和自制抗原检测新城疫、禽流感、产蛋下降综合征阳性血清及鸡阴性血清HI抗体≤3log2,特异性良好。依据产品质量标准使用3批HI抗原对洛阳普莱柯公司生产的10批鸡新城疫(La Sota株)-传染性支气管炎(M41株)-禽流感(H9亚型HL株)三联灭活疫苗和4批鸡新城疫(La Sota株)-传染性支气管炎(M41株)-减蛋综合征(AV127株)三联灭活疫苗共计14批产品的传染性支气管炎成分进行了效力检验,结果表明使用灭活疫苗二免后血清HI抗体几何平均滴度较活疫苗首免后血清HI抗体平均几何滴度分别高9.4倍(2007001)、8.5倍(2007002)、9.8倍(2007003)。用荷兰GD公司HI抗原检测结果为10.5倍。3批冻干抗原于4℃保存一年HA效价不变。使用三批经2007003批HI抗原效力检验合格的鸡新城疫(La Sota株)-传染性支气管炎(M41株)-禽流感(H9 HL株)三联灭活疫苗进行了鸡传染性支气管炎灭活疫苗效力评价方法的研究。结果表明,仅使用活疫苗免疫的B组试验鸡在产蛋高峰期经IBV M41株攻毒后在4周内产蛋率下降可达17%,作为对照的C组试验鸡在产蛋高峰期经IBV M41株攻毒后在4周内产蛋率下降达34%。而使用活疫苗基础免疫后再使用灭活疫苗加强免疫的A组试验鸡在产蛋高峰期可以抵抗IBV M41株的攻击并可维持高峰期的产蛋量。使用2-4周龄SPF鸡按两步法效力检验合格的灭活疫苗应用于产蛋鸡可以对生产性能起到良好的保护作用,说明以血清学效力检验方法作为鸡传染性支气管炎灭活疫苗的效力检验标准是科学的。
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