HBV血清标志物五种检测方法学比较研究

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目的:  探讨五种HBV血清学标志物检测方法即研究酶联免疫(ELISA)法、时间分辨免疫荧光(TRFIA)法、化学发光(CLIA)法、核酸扩增(PCR)法及四种方法联合检测乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染标志物的检出情况,分析各方法间的差异,为临床诊疗和/或献血员筛选提供有价值的实验室检测方法。  方法:  1.研究对象选择选择自2013年7月1日至2014年7月1日于安康市中医医院进行HBV感染标志物检测的7168例受检者作为研究对象。  2.研究方法  2.1 应用ELISA法及TRFIA法对所有受检者进行HBV感染标志物五项进行定性检测。  2.2 应用ELISA法及TRFIA法对所有受检者进行HBV感染标志物五项含量进行检测。  2.3 应用CLIA法对所有受检者进行HBV表面抗原(HBsAg)的含量进行检测。  2.4 应用PCR法对所有受检者进行HBV的核酸定量进行检测。  3.统计学方法采用SPSSI9.0统计学分析软件对结果数据进行分析检验,计量资料选择应用均数±标准差进行表示,组间对比应用x2检验(资料服从正态分布),P<0.05为有统计学意义。  结果:  1.HBV感染标志物检出率:四种检测方法对HBV的阳性结果的检出情况为:TRFIA法:698例(9.74%); ELISA法:619例(8.64%); CLIA法:613例(8.55%); PCR法:437例(6.09%)。TRFIA法对HBV的阳性结果的检出率明显高于其他3种检验方法,而PCR法对HBV-DNA的阳性结果的检出率明显低于其他3种方法对于HBsAg的阳性结果的检出率(P<0.01)。  2.ELISA法检测出619例HBsAg阳性结果中,用TRFIA法检测出10例阴性,用CLIA法检测出8例阴性,用PCR法HBV-DNA检测出186例阴性;ELISA法检测出6549例HBsAg阴性结果中,用TRFIA法检测出89例阳性,用CLIA法检测出2例阳性,用PCR法HBV-DNA检测出4例阳性。  3.TRFIA法检测出698例HBsAg阳性结果中,用ELISA法检测出89例阴性,用CLIA法检测出86例阴性,用PCR法HBV-DNA检测出264例阴性;TRFIA法检测出6470例HBsAg阴性结果中,用ELISA法检测出10例阳性,用CLIA法检测出1例阳性,用PCR法HBV-DNA检测出3例阳性。  4.CLIA法检测出的613例HBsAg阳性结果中,用TRFIA法检测出1例阴性,用ELISA法检测出2例阴性,用PCR法HBV-DNA检测出180例阴性;CLIA法检测出6555例HBsAg阴性结果中,其中用TRFIA法检测出86例阳性,用ELISA法检测出8例阳性,用PCR法HBV-DNA检测出4例阳性。  5.PCR法检测出的437例HBV-DNA阳性结果中,用TRFIA法检测出HBsAg阴性3例,用CLIA法检测出HBsAg阴性4例,用ELISA法检测出HBsAg阴性4例;PCR法HBV-DNA检测出6731例HBV-DNA阴性结果中,用TRFIA法检测出HBsAg阳性264例,用CLIA法检测出HBsAg阳性180例,用ELISA法检测出HBsAg阳性186例。  结论:  1.单一检测方法中TRFIA法的HBV阳性结果检出率明显高于其他3种方法(P<0.01),PCR法的HBV-DNA阳性结果检出率明显低于其他3种方法对于HBsAg的阳性结果检出率(P<0.01)。说明TRFIA法对于HBsAg的敏感性明显优于其他检测方法。  2.单一的四种检测方法对HBV阳性、阴性结果互有交叉(单一方法间阴性、阳性结果不一致),检出率各有差异。  3.四种方法联合检测能提高HBV血清标志物检出率,对于献血者的HBV感染初筛以及已采集血样的复检,能够减少HBV医源性传播,保障输血安全。  4.在临床诊疗过程中,应用四种方法联合检测能够提高诊断的准确率,减少HBV的误诊与漏诊率,确保医疗安全。
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