【摘 要】
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布顿大麦（Hordeum bogdanii）是一种能够生存在荒漠和盐碱地等逆境条件下的野生禾本科牧草,这种草的适应性强,产草量高,能做生态修复也能做饲用牧草,是重要的野生种质资源。禾本科植物主要通过分蘖实现高产,分蘖的生长发育受多方面因素影响,如植物激素、与分蘖有关的基因、禾草内生真菌等。为了探究内生真菌对布顿大麦分蘖的内源激素调控机制,本研究先接Epichlo（?）bromicola内生真菌到无
【基金项目】
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国家自然科学基金项目“内生真菌促布顿大麦分蘖的内源激素调控机理研究”的部分研究成果（项目编号:31802132）课题主持人:陈水红教授（塔里木大学）；
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布顿大麦（Hordeum bogdanii）是一种能够生存在荒漠和盐碱地等逆境条件下的野生禾本科牧草,这种草的适应性强,产草量高,能做生态修复也能做饲用牧草,是重要的野生种质资源。禾本科植物主要通过分蘖实现高产,分蘖的生长发育受多方面因素影响,如植物激素、与分蘖有关的基因、禾草内生真菌等。为了探究内生真菌对布顿大麦分蘖的内源激素调控机制,本研究先接Epichlo（?）bromicola内生真菌到无菌布顿大麦植株（E-）,构建了带菌布顿大麦（E+）用于后续实验;在分蘖期取样测定布顿大麦E+、E-植株根、茎、叶三个部位生长素（IAA）、茉莉酸（JA）、赤霉素（GA3）、玉米素核苷（ZR）和反式玉米素（ZA）、脱落酸（ABA）、油菜素内酯（BR）、独角金内酯（SL）几种内源激素含量,探究内生真菌共生对内源激素的影响;使用Q-PCR绝对定量法测定共生体和离体菌的per A基因在每纳克共生体基因组g DNA中的拷贝数,揭示了内生真菌共生后对宿主菌丝浓度的影响;对布顿大麦分蘖相关基因TB1进行了克隆和测序,对序列进行了生物信息学分析,并对温宿县和柴达木盆地E+、E-布顿大麦植株TB1基因用Q-PCR方法测定了该基因的相对表达量。主要研究结果如下:（1）布顿大麦E.bromicola内生真菌的回接与鉴定从形态上看,该菌落呈圆形,中间突出四面平坦,绒毡状,颜色和菌丝为白色,有隔;与接菌前序列比对结果,确定回接菌为接入的E.bromicola内生真菌,表明内生真菌回接成功,为后续研究提供了实验材料。（2）布顿大麦共生体分蘖相关内源激素含量的分析内生真菌降低了布顿大麦茎杆的IAA、GA3、ABA含量,提高了茎杆的ZA、ZR、BR、SL含量,降低了叶中JA含量。分蘖发生于茎基部,所以内生真菌可能通过对宿主茎秆各激素含量的影响调控分蘖的发生;可见内生真菌对宿主分蘖的影响是多激素共同作用的结果。对比离体菌中几种内源激素含量,表明带菌植株产生的内源激素应是与植物共生后真菌促进植物调控相关激素。（3）E.bromicola内生真菌-布顿大麦共生体菌丝浓度的测定克隆了布顿大麦内生真菌E.bromicola的per A基因,经Q-PCR绝对定量方法,测定了per A基因在每纳克共生体基因组g DNA中的拷贝数,共生体中含量高于离体培养内生真菌中的,说明E.bromicola内生真菌与布顿大麦共生能提高共生体的菌丝浓度。（4）布顿大麦TB1基因的克隆和表达量分析布顿大麦TB1基因与Hordeum vu Lgare subsp的TB1同源性最高,为96.72%,且与Hordeum vu Lgare subsp的TB1处于同一支系。克隆的布顿大麦TB1基因的CDS区全长为804 bp,编码了267个氨基酸残基;TB1基因无启动子和Poly A位点;经亚细胞定位TB1基因预计在液泡,预测TB1蛋白质无跨膜结构域、无信号肽、不属于跨膜蛋白、存在于TCP家族;推测TB1蛋白质为不稳定蛋白质。分析新疆温宿县和青海柴达木盆地根、茎、叶中TB1基因表达量,内生真菌均显著降低了植株分蘖发生部位茎秆中的TB1基因表达量,表明内生真菌通过影响宿主TB1基因表达进而促进其分蘖。
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