云南普洱5种石斛内生菌分离、鉴定及功能分析

来源 :云南农业大学 | 被引量 : 6次 | 上传用户:beckham11
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石斛属(Dendrobium)是兰科(Orchidaceae)中的第二大属,是一种多年附生草本植物,具有较高的药用和观赏价值。由于人为过渡采集和生境破坏,野生石斛资源日趋减少。云南近几年石斛人工种植面积不断增加,而病虫害、营养不足等问题较突出。本文对云南普洱5种石斛内生菌进行了研究,从中分离内生细菌和真菌,并作了分子鉴定和部分功能分析试验,旨在弄清其中内生菌多样性和筛选有益菌株。取得了如下主要研究成果:1、5种石斛及不同组织中内生菌数量不同。内生细菌130株中,鼓槌石斛有48株,叠鞘石斛有34株,且鼓槌石斛为叶>茎>根,球花石斛为茎>叶>根,叠鞘石斛、金钗石斛和束花石斛均为根>茎>叶;真菌361株中,束花石斛中91株和金钗石斛85株,5种石斛均为叶高于茎和根。2、16S rDNA序列将内生细菌鉴定为8个属,其中芽孢杆菌属为优势属,常见属有不动杆菌属、肠杆菌属、克雷伯氏菌属等。ITS序列将内生真菌鉴定为27个属,其中优势属是炭疽菌属和镰刀菌属。内生真菌多样性指数以鼓槌石斛最高(2.21),5种石斛叶(0.95-1.39)高于茎(0.47-1.01)和根(0.41-0.82);5种石斛间相似性系数在0.27-0.75间,球花石斛和叠鞘石斛间最高,达0.75。3、33株内生细菌具拮抗活性,隶属于芽孢杆菌属、不动杆菌属和链霉菌属,它们至少对尖孢镰刀菌、三七根腐菌、烟草疫霉菌、阴沟肠杆菌4种病原菌中1种有拮抗活性。8株内生真菌具拮抗活性,隶属于镰刀菌属、球座菌属和炭角菌,它们至少对尖孢镰刀菌和烟草疫霉菌中1种有拮抗活性。4、筛选到7株促生长细菌。在盆栽试验中,芽孢杆菌SYB1和巨大芽孢杆菌JGB2对萝卜增产效果最显著,增产55.89%和54.07%;芽孢杆菌QJB7对油菜增产效果最显著,增产30.24%;在田间试验中,芽孢杆菌QJB7对萝卜增产效果最显著,增产24.30%,芽孢杆菌DJB6使玉米鲜重增加12.75%,苍白杆菌DGB13使油菜鲜重增加15.81%。5、筛选到7株促生长真菌。田间试验表明:炭疽菌GYF14和镰刀菌DJF12对萝卜增产效果最显著,增产31.84%和28.99%;炭疽菌QYF17使萝卜鲜重增加7.32%;球毛壳菌DJF5使玉米鲜重增加11.09%,株高增加17.56%。6、筛选到12株解无机磷细菌,其中埃希氏杆菌DJB1使玉米鲜重增加14.75%,埃希氏杆菌DJB1、DGB11和乙酸钙不动杆菌DJB2分别使油菜鲜重增加56.04%、41.86%和30.87%。筛选到1株固氮细菌GYB1,属产酸克雷伯氏菌,使油菜和玉米鲜重分别增加59.96%和27.15%。
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