【摘 要】
：
目的:制备一种具有脑靶向功能的载肟类重活化剂（HI-6）的脂质体制剂,并对其脑靶向功能进行体内外的初步评价。方法:（1）本研究采用硫酸铵梯度-薄膜分散法制备了载HI-6脂质体。使用卵磷脂（Phosphatidylcholine,PC）及胆固醇（Cholesterol,CHOL）作为脂材,采用高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography,HPLC）,考
论文部分内容阅读
目的:制备一种具有脑靶向功能的载肟类重活化剂（HI-6）的脂质体制剂,并对其脑靶向功能进行体内外的初步评价。方法:（1）本研究采用硫酸铵梯度-薄膜分散法制备了载HI-6脂质体。使用卵磷脂（Phosphatidylcholine,PC）及胆固醇（Cholesterol,CHOL）作为脂材,采用高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography,HPLC）,考察在不同卵磷脂与胆固醇之比、不同卵磷脂与投药量之比、不同超声时间下载HI-6脂质体的包封率及载药量,并结合星点设计-响应面法优选处方,以激光粒度分析仪进行了相关表征;（2）使用EDC·HCl法合成制备了脑靶向肽c（RGDyK）-PEG2000-CHOL;在优选载HI-6脂质体制备方法的基础上,引入了c（RGDyK）-PEG2000-CHOL,制备了c（RGDyK）介导的载HI-6脑靶向脂质体,并使用激光粒度分析仪进行了相关表征;（3）对大鼠脑星型胶质细胞（AS）和脑微血管内皮细胞（BMECs）进行了原代培养和鉴定,使用Transwell小室分别制备了BMECs单培养和BMECs及AS共培养体外BBB模型,并进行了相关评价;（4）采用CCK-8法考察了游离HI-6及各种不同载HI-6脂质体制剂对BMECs的细胞毒性;使用Transwell小室考察了游离HI-6及各种不同脂质体制剂对体外BBB模型的渗透率;并通过静脉给药和鼻腔给药两种不同给药途径,采用ELLMAN法测定敌敌畏（DDVP）染毒SD大鼠全血和脑的总巯基含量,考察在不同给药方式下游离HI-6及不同脂质体制剂对中枢和全血的中毒酶重活化率。结果:本研究成功合成了c（RGDyK）-PEG2000-CHOL,并首次制得载HI-6的脑靶向脂质体(c（RGDyK）-PEG2000-HI-6-lipo),制得的脂质体制剂呈圆形,且粒子之间处于分散状态,平均包封率为（70.23±2.18）%,平均载药量为（2.86±0.07）%,平均粒径为242.9 nm（PDI=0.149）,ζ电位为-16.2 m V。此外,本研究成功提取了AS及BMECs,制备得到的不同载HI-6脂质体制剂对BMECs的细胞毒性低;并建立了体外BBB模型,其TTER值达到了（54±3）Ω·cm~2,符合体外BBB模型建立要求;c（RGDyK）-PEG2000-HI-6-lipo与未经修饰的载HI-6脂质体（HI-6-lipo）相比,具有更好的跨越体外BBB的能力。对通过不同给药途径救治的染毒大鼠全血和中枢中毒酶重活化率的计算,可知c（RGDyK）-PEG2000-HI-6-lipo的中枢靶向效果比HI-6-lipo及游离HI-6更强,经鼻给药途径相比静脉给药途径具有更好的中枢靶向性。结论:本研究的体内外实验证明,c（RGDyK）-PEG2000-HI-6-lipo与HI-6-lipo及游离HI-6相比,拥有更好的跨越BBB的能力,且对中枢中毒酶的重活化率更高,体现出使用c（RGDyK）环肽修饰的脂质体具备更好的中枢靶向性,本研究的成功有望进一步降低神经性毒剂对中枢神经系统的危害。
其他文献
目的:本论文旨在以人工掺杂和生物富钒两种方法探索雪菊富钒的可行性,并考察其提取物对α-葡萄糖苷酶活性的影响及酶抑制作用类型。方法:（1）建立石墨炉原子吸收分光光度法测定样品中钒（V）含量;以4-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷（p NPG）为底物,阿卡波糖为阳性对照药,构建体外α-葡萄糖苷酶活性抑制模型;根据酶促反应动力学原理,探索样品对α-葡萄糖苷酶活性抑制类型。（2）在单因素试验的基础上,以乙醇
近年来我国出境游人数快速增加,而游客素质良莠不齐,中国出境游客更容易受到全球各个国家的关注。本文以导游的讲解艺术,穿插实际工作中的案例对游客在境外不文明行为产生的主、客观原因进行分类解析,进而给出导游在讲解层面上对文明旅游引导的讲解示例,以期促进和提升游客在境外旅游的文明素养。
目的:二黄祛脂方（EHQZF）临床上用于治疗非酒精性脂肪肝（NAFLD）,但其作用机制未知,本研究主要考察EHQZF治疗NAFLD的关键中药、有效成分、重要靶点和核心机制,并进一步考察EHQZF与其精简方降血脂、治疗脂肪肝的疗效对比,从而简化配方。方法:通过网络药理学分析EHQZF的各中药归经、成分分布、主要治疗疾病及EHQZF治疗NAFLD的主要成分和作用机制;利用LC-MS对关键有效成分分析定
目的:（1）以黄芩苷为原料合成黄芩苷-2-乙氧基乙酯（BAE）,对其生物活性进行研究;（2）建立庆大霉素致大鼠急性肾损伤（AKI）模型,探讨黄芩苷-2-乙氧基乙酯对急性肾损伤大鼠的治疗作用及其作用机制。方法:（1）以黄芩苷为原料,通过酰氯法、直接酯化法和卤代烃取代法合成黄芩苷-2-乙氧基乙酯;并通过核磁、质谱等对其进行结构表征,对中间产物黄芩苷钠盐合成所用碱的种类和用量和结晶溶剂的种类和用量进行优
实体对齐（Entity Alignment）旨在发现不同知识图谱（Knowledge Graph）中指代相同事物的实体,是知识图谱融合的关键技术,近年来受到了广泛的关注.早期,研究者们使用字符串的各种特征来进行实体对齐工作.近年来,随着知识表示学习（Knowledge Representation Learning）技术的不断发展,研究者们提出了许多基于知识表示学习的实体对齐方法,效果明显优于传统
目的:探究田蓟苷预处理对缺氧复氧（H/R）诱导的心肌细胞的保护作用,以及是否通过调节p53/NOX4通路调节细胞凋亡和氧化应激损伤,为深入研究田蓟苷的心肌保护作用提供试验基础和理论依据。方法:（1）体外培养大鼠H9c2心肌细胞,构建缺氧/复氧损伤（H/R）模型,将细胞分为3组:正常组（Normal组）,模型组（H/R组）,田蓟苷给药组（Til组）。（1）CCK-8法测定细胞活力,确定田蓟苷给药浓度
含铋疗法已被建议作为治疗胃溃疡（GU）和根除幽门螺杆菌（HP）的一线疗法。目前的治疗策略称为四联疗法,包括质子泵抑制剂、铋剂和两种广谱抗生素,生物利用度较低,并且可能会影响患者用药依从性[1]。金属-酚醛网络（MPN）因其在合成生物学、药物递送和生物医学成像等领域的应用而受到广泛关注[2]。本研究中,从天然产物的角度出发,筛选出没食子鞣质中抗GU的活性多酚成分,阐明活性成分抗GU的相关分子机制;建
目的:本研究旨在通过变应原鼻腔激发试验（nasal provocation test, NPT）评估尘螨特异性免疫治疗（allergen immunotherapy, AIT）的疗效，探讨NPT在AIT疗效评估中的应用价值。方法:纳入83例接受尘螨AIT治疗的变应性鼻炎患者，伴或不伴支气管哮喘。比较AIT治疗前及治疗后1年，患者症状评分（symptom score, SS）、每日用药评分（dail
目的:人体呼出气疾病标识物的含量变化能够动态的反应机体的代谢情况,通过检测呼出气疾病标识物的含量可以评估人体的健康情况,辅助医生进行疾病的早期筛查与诊断。因此开发一种成本低、操作简单、效率高的呼出气体标识物检测技术具有重要意义。可视化气体传感器因其具有廉价,准确,便携和可视化的特点,被认为是一种有前途的非侵入性早期疾病筛查方法。本研究借助可视化比色传感技术,拟开发出对于呼出气疾病标识物气体具有较高