基因工程创新药物CNB的研制开发及其免疫作用机理研究

来源 :北京师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fengjintao1111
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钙调神经磷酸酶(Calcineurin,CN)是目前所知唯一一种依赖Ca<2+>/CaM的蛋白磷酸酶.B亚基(CNB)是调节亚基.CNB对于免疫系统的功能研究未见其它报道.该研究的基础是在魏群教授指导下,由张宁、姜国华、严明山等取得的以下实验结果:(1)CNB能显著延长荷H22腹水瘤小鼠的存活期、抑制荷S180实体瘤小鼠肿瘤的生长;(2)CNB不能直接与肿瘤细胞结合,但能与脾细胞有结合;(3)CNB能刺激脾细胞的增殖.由此确定了CNB抗肿瘤方面的药物用途,申请了CNB作为药物用途的国际、国内发明专利,并获得国家新药基金的支持.该文主要从以下几个方面对CNB的生产工艺及作用机理进行了研究.1.通过系统的研究CNB在摇瓶中的表达工艺,优化了培养配方和摇瓶培养工艺,进行了发酵罐表达,通过研究,基本确定了发酵表达工艺,达到了较高的表达量,800mg/L左右.2.为达到生物制品质量要求,研究了CNB的纯化工艺.3.该文对CNB的作用机理研究主要从CNB对几类免疫细胞的作用入手,分别实验了荧光标记的CNB与T细胞等细胞株及脾细胞的结合,结果基本否定了在成熟T、B细胞上受体存在的可能性.(2)实验了CNB对小鼠体内和体外NK活性的影响,发现腹腔注射CNB可以提高小鼠脾细胞对靶细胞Yac-1的杀伤活性.体外共培养小鼠脾细胞和Yac-1,加入CNB可显著提高脾细胞的杀伤活性.(3)实验了CNB对小鼠脾细胞的增殖的影响.
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