遗传性多发性外生性骨疣(Hereditary multiple exostoses，HME)是一种常染色体显性遗传病，以骨骼系统多发性外生性骨疣为主要特征，骨疣通常发生在肱骨、前臂、膝部、踝关节等部位，成对称性分布。80[％]的多发性外生性骨疣患者具有家族史，外显率为66[％]～100[％]。多发性外生性骨疣在出生时即可发生，并且在大小和数目上不断增长，直到青春期骨骼停止生长为止。该病通常引起身材矮小和骨骼畸形，主要并发症为影响关节功能、压迫临近组织和引起恶变，大约O.5[％]～2[％]的骨疣可恶性转化为软骨肉瘤。本研究收集了十二个多发性外生性骨疣家系，我们选取家系中的先证者，直接测序EXTl基因的1、2、6和8号外显子寻找致病突变。 目前研究表明：44[％]～66[％]的多发性外生性骨疣与EXTl基因有关，而27[％]与EXT2基因有关，10[％]由新生突变引起。EXTl基因突变热点区域为1、2、6和8号外显子，EXT2基因突变热点区域为2和8号外显子。我们直接对家系先证者进行了EXTl基因突变热点区的突变筛查，结果在3个家系中找到了致病突变，它们分别是369delA、T811C和G1023C。这三个突变都是未经报道的新突变，而且都与疾病表型共分离，在100个家系外正常对照中均未发现此突变。另外，我们还在一个散发患者中发现了c．1633—26C>A变异，此变异不存在于患者表型正常的父母双亲中，是一个新生变异，我们没有在200个家系外正常人中检测到这一变异。因此，我们认为EXTl基因的369delA、T811C和G1023C突变分别是导致这三个家系发生多发性外生性骨疣的致病突变，而EXTl基因的c.1633—26C>A变异可能是导致这个散发患者发生多发性外生性骨疣的致病突变。 为了阐明我们发现的EXTl基因c.1633—26C>A变异与疾病的关系，我们一方面从病人永生化的淋巴细胞系中提取RNA，经过RT-PCR后，我们没有发现异常的mRNA；另一方面考虑到此变异可能位于分支点区域，而分支点区域对mRNA前体的剪接有重要作用，因此我们进行了分支点定位，结果发现分支点并不是位于变异所在位置，而是位于7号内含子3’端上游36bp；与此同时，我们还采用overlap法从患者基因组中扩增构建了野生型和突变型两个Minigene。通过将其克隆至pcDNA3.1(+)载体后瞬时转染COS-7细胞，再经过提取COS-7细胞总RNA进行RT-PCR，我们没有检测到异常mRNA的表达。因此通过三个独立的实验，我们尚不能肯定此变异和疾病之间是否存在关系，可能该变异以一种机制不明的方式致病；可能该变异没有影响剪接而是影响了体内其他生化过程；也可能此变异只是一个多态，有待于我们对突变致病机理的更进一步发现。