CoCl2低氧诱导食管癌细胞VEGF与per2的节律性研究

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目的:食管癌是严重威胁人们身体健康的消化道恶性肿瘤,它的发病与内在基因、环境、生活习惯等均相关。在寻找对肿瘤的治疗方法的同时发现生物节律的紊乱导致肿瘤的发病与进展。作为生物节律发生的物质基础,生物节律基因per2在肿瘤的发生进展中起到非常重要的作用,本实验通过体外培养食管癌Eca-109细胞,检测离体癌细胞在持续黑暗与正常光暗循环条件下per2与VEGF表达的节律相位;鉴定CoCl2诱导食管癌细胞化学性低氧的最佳浓度及不同浓度对食管癌细胞增殖性毒性,从而为肿瘤的时间生物学治疗提供一定的理论依据。方法:采用避光低氧与低氧方式培养食管癌Eca109细胞分别作为实验组与对照组,定量PCR检测per2与VEGF基因的节律相位;cck-8检测不同浓度CoCl2诱导食管癌细胞低氧的情况。结果:食管癌Eca-109细胞无论在持续黑暗还是正常光暗循环条件下,per2与VEGF的表达均成自发节律性变化;并且节律表达的高低峰相位相反;CoCl2可以诱导食管癌细胞VEGF的表达,且不同浓度CoCl2溶液对食管癌细胞生长增殖性影响不同。结论:无论持续黑暗还是正常光暗循环并不会影响食管癌细胞节律基因per2与VEGF的表达,per2对VEGF的表达呈负性调节作用;CoCl2在150μmol/l浓度下诱导食管癌细胞低氧效果最佳,在高浓度下(250、300、400μmol/l)对食管癌细胞的增殖有明显的抑制作用。
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