幽门螺杆菌（H.pylori）是一种螺旋状革兰氏阴性、微嗜氧的人类病原菌,对生长环境要求及其严格。H.pylori感染是导致萎缩性胃炎、癌前病变和胃癌的发生的主要原因。H.pylori在儿童早期就感染了,并且在没有抗生素治疗的情况下会持续感染。然而,对感染H.pylori且无症状的儿童和年轻人都进行流行病学分析或上消化道内窥镜检查是不现实的。此外,由于年龄较小的儿童敏感性较低,不适合进行血清抗体检测。¹³C-尿素呼吸试验（UBT）虽然可以在年龄较大的儿童中进行,但不适用于幼儿。粪便样品基质复杂,预处理时间长,传统检测技术的酶联免疫吸附法（ELISA）不能满足粪便抗原检测的要求,粪便抗原检测的新技术受到了人们的重视。本文主要将H.pylori的外膜蛋白、血蓝蛋白（KLH）-合成肽作为抗原,分别免疫新西兰大白兔和Balb/C小鼠,获得多克隆抗体和单克隆抗体。然后经过饱和硫酸铵梯度盐析法和Protein G亲和纯化获得特异性的抗体。SDS-PAGE凝胶电泳分析测定多克隆抗体和单克隆抗体的纯度以及相对分子质量;酶联免疫吸附法（Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测纯化的多克隆抗体和单克隆抗体的效价。多克隆抗体结合荧光量子点形成量子点探针;单克隆抗体结合免疫磁珠形成免疫磁珠探针,免疫磁珠探针在复杂基质中高效特异性结合目标菌,形成抗原-抗体-免疫磁珠复合物,通过洗脱,形成抗原-抗体复合物去特异性结合量子点探针,最后将这个复合物在荧光光谱仪下进行检测。本文的研究结果表明:采用经过饱和硫酸铵梯度盐析法和Protein G亲和纯化的单克隆和多克隆抗体,纯度均达到90%以上。单克隆抗体纯化后的效价达到1:900,多克隆抗体纯化前的效价为1:32000,纯化后的效价是1:128000,效价提高了4倍。制备的单克隆抗体和多克隆抗体具有效价高、特异性好、性质稳定的特点。通过优化检测方法,免疫磁珠和量子点结合特异性抗体检测H.pylori的检测方法的共耗时不超过120 min,检测限为10²CFU/m L,线性范围为10～10⁶CFU/m L,拟合的回归直线方程为y=53.0342x+15.2080（R²=0.9962）,呈良好的线性关系。该检测与粪便其他常见的10种细菌不存在交叉反应,说明建立的方法具有较强的特异性。利用该检测方法对健康人体粪便中不同浓度的H.pylori进行了初步的定性检测,样品的加标回收率为89.1%～107.2%,说明建立的方法具有较好的准确性。通过与其他免疫磁珠和量子点结合特异性抗体的文献检测时间和检测限的结果对比,本文的研究方法具有耗时短,灵敏度高的优点。综上所述,本文建立的检测人体粪便中的H.pylori方法满足免疫分析规定的检测要求,从而为H.pylori的诊断奠定基础。