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生物催化是现代工业中极其重要的技术之一,人们对于作为催化剂存在的酶进行的研究一直不曾中断,近年来,利用磁性载体对酶进行纯化与固定化的研究越来越多,通过磁场达到分离的效果十分理想。所以,本课题采用对磁性纳米四氧化三铁和邻苯二酚的联合使用作为载体,用于蛋白与酶的纯化、固定化以及共固定研究,具体内容分为以下几部分：(1)谷胱甘肽S-转移酶(GST)标签蛋白的分离纯化我们制备了磁性纳米颗粒(GSH-PD-IONPs),用于分离纯化GST标签蛋白。结果表明GSH-PD-IONPs对于GST标记的绿色荧光蛋白(GST-GFP)具有良好的亲和性和选择性,说明GSH-PD-IONPs能够用于GST标签蛋白的分离纯化。(2)His标签蛋白的分离纯化及固定化我们制备得到用于分离纯化及选择性固定化His标签蛋白的磁性纳米颗粒(Ni2+-PD-MNPs)。结果表明,Ni2+-PD-MNPs对于组氨酸标签标记的红色荧光蛋白(His-RFP)具有选择性。此外,我们从细胞裂解液中选择性的固定了带有His标签的转氨酶(ω-转氨酶BJ110),固定化酶不仅提高了其比活,而且增强了酶的稳定性,并且可以重复使用。(3)葡萄糖氧化酶与过氧化氢酶共固定研究我们在磁性纳米四氧化三铁(IONPs)表面包裹上邻苯二酚壳聚糖(CCS-IONPs)用来共固定化葡萄糖氧化酶(GOD)和过氧化氢酶(CAT)。在最优条件下,载体对于GOD挂载量达到了402.82mg/g,活力回收率高达85.34%。当共固定GOD和CAT时,挂载量达到了566.89mg/g,其中GOD的活力回收率达到了137.83%,略微高于两种酶分别固定之后的联合使用(128.01%)。此外,共固定酶在重复使用10次之后,保留了超过40%的初始活力,并且提高了其温度稳定性和pH稳定性。