双歧杆菌完整肽聚糖体外诱导大肠癌Lovo细胞凋亡的实验研究

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目的探讨双歧杆菌表面分子完整肽聚糖(Whole Peptidoglycan,WPG)诱导人大肠癌Lovo细胞凋亡的作用及其可能机制。方法人大肠癌Lovo细胞与不同浓度WPG(10μg/ml,20μg/ml,40μg/ml,80μg/ml,160μg/ml,320μg/ml,200μl/孔)共孵育一定时间(24h、48h和72 h)后,采用MTT法检测WPG对Lovo细胞的抑制作用。人大肠癌Lovo细胞与80u g/ml的WPG共孵育72小时后,采用荧光素FITC标记的Annexin V检测WPG对大肠癌Lovo细胞细胞凋亡的影响。Lovo细胞与80μg/m l WPG共孵育72 h后,采用免疫细胞化学法检测WPG对大肠癌Lovo中N F-κB表达的影响。结果MTT法检测结果显示:浓度为10μg/ml~320μg/ml的双歧杆菌WPG对大肠癌Lovo细胞的增殖均有一定的抑制作用,且随着双歧杆菌WPG浓度增大,作用时间延长,其抑制效果越明显。流式细胞仪检测结果显示:空白对照组的大肠癌细胞早期凋亡细胞占12.02%,双歧杆菌WPG处理组大肠癌细胞早期凋亡细胞占36.7 5%,两组间有显著性差异(P<0.01)。免疫细胞化学结果最示:空白对照组大肠癌细胞的NF-κB阳性产物存在于胞浆和胞核,胞核较多,其NF-κB阳性细胞密度为(1 05.48±9.2 6)个,双歧杆菌WPG处理组大肠癌细胞NF-κB的阳性产物也存在于胞浆和胞核,但主要位于胞浆,其NF-κB阳性细胞密度为(63.27±8.63)个,差异具有统计学意义(P<0.0 1)。结论双歧杆菌WPG具有抑制大肠癌Lovo细胞增殖和诱导Lovo细胞凋亡的作用,其作用机制可能与下调凋亡信号分子NF-κB的活化有关。
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