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Ezrin属于ERM家族,是细胞膜蛋白与细胞微丝骨架之间的连接者,在维持细胞形态和调控细胞内外信号转导等过程中发挥着十分重要的功能。本课题组以往曾研究发现,在永生化食管上皮细胞的恶性转化中,Ezrin显著异常过表达,敲降ezrin基因表达可以有效抑制食管癌细胞的移动侵袭能力。而临床食管癌组织检测结果表明,Ezrin的过表达与患者的生存率呈显著负相关关系;说明Ezrin具有警示食管癌预后的作用,是重要的分子标志物。在上述研究基础之上,本论文拟通过突变关键氨基酸残基位点,即567上的苏氨酸,结合反义封闭实验,进一步深入探讨了Ezrin促进食管癌细胞移动的分子机制。首先,将ezrin的三种突变质粒,包括pEGFP-N1-ezrin-T/A ( T567A )、pEGFP-N1-ezrin-T/D ( T567D )、pEGFP-N1-ezrin-Nter ( N端截断型, 309aa ),以及pEGFP-N1-ezrin-wt(野生型)分别转染食管癌细胞EC109,进而检测上述各组细胞的移动能力的变化。结果发现,与转染空载体(pEGFP-N1)的对照组细胞比较,1)转染pEGFP-N1-ezrin-T/D质粒的食管癌细胞的移动能力显著增强;2)转染pEGFP-N1-ezrin- T/A和pEGFP-N1-ezrin-wt的食管癌细胞的移动能力均未见明显变化; 3 )而转染pEGFP-N1-ezrin-Nter的食管癌细胞的移动能力显著下降。这说明567苏氨酸残基位点对于Ezrin促进食管癌细胞移动能力至关重要,可能与该位点的磷酸化修饰相关。其次,检测上述各组细胞的增殖能力的变化。结果发现,与转染空载体(pEGFP-N1)的对照组细胞比较,1)转染pEGFP-N1-ezrin-T/D的食管癌细胞的增殖能力有明显增强,2)分别转染pEGFP-N1-ezrin-T/A、pEGFP-N1-ezrin-Nter和pEGFP-N1-ezrin-wt的食管癌细胞的增殖能力未见明显改变。最后,检测上述各组细胞的细胞周期。结果发现,与转染空载体(pEGFP-N1)的对照组细胞比较,转染pEGFP-N1-ezrin-T/A和pEGFP-N1-ezrin-Nter的食管癌细胞被阻滞在G1期,转染转染pEGFP-N1-ezrin- wt的食管癌细胞被阻滞在S期,转染转染pEGFP-N1-ezrin-T/D的食管癌细胞被阻滞在G2/M期。综上所述可见,Ezrin促进食管癌细胞移动作用的呈现与其C端567位点上的苏氨酸关系密切,而且还可能涉及到该位点的磷酸化修饰加工等过程。