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目的创伤后增生性瘢痕（HS）是困扰临床的关键问题之一，其本质是一种纤维化疾病。但具体调控机制不详。通过对多种纤维化疾病的研究发现，miR-21在转录后水平通过调控TGF-β和Smad7基因的表达，对纤维化的发生起促进作用。在前期研究中，我们发现HS组织中miR-21表达显著升高，并在预实验中观察到TGF-β促进miR-21的表达。我们推测“皮肤创伤愈合后局部miR-21表达升高，促进了TGF-β的表达，而TGF-β进一步加强了miR-21对瘢痕形成的促进作用，从而形成正反馈，导致HS的形成”是瘢痕增生的新机制。为证实这一假说，我们拟以成纤维细胞（正常皮肤和HS组织）和瘢痕模型为研究对象，应用real-time PCR、细胞转染、anti-miR、免疫组化等技术，从细胞（体外）-组织（体内）层次证明我们的假说。此研究有望深入阐明miR-21在HS形成中的作用及机制，并为HS的生物学防治提供新靶点。方法1、包括临床患者正常皮肤及HS标本收集；组织石蜡包埋，切片进行HE染色、马森三色染色和免疫组化染色；组织进行胶原定量检测；real-time PCR检测人正常皮肤组织及临床HS组织中miR-21mRNA表达水平差异；2、进行人正常皮肤成纤维细胞和HS成纤维细胞的培养、转染；构建miR-21过表达和反义干扰载体，定量PCR、WB检测COLI、COL III、Fibronectin（FN）及α-SMA，从而观察miR-21对成纤维细胞生物学特性的影响。3、转染mimic-miR-21或anti-miR-21，同时加入TGF-β1或TGF-β1受体抑制剂，定量PCR、ELISA检测TGF-β1及瘢痕相关蛋白的表达；从而明确miR-21影响瘢痕形成是否与TGF-β通路有关；4、通过多个生物信息学网站和软件（Targetscan, PicTar, miRanda及MicroInspector），对miR-21的靶基因进行预测，筛选与瘢痕形成、肌成纤维分化等功能相关的特定靶基因；使用miR-21过表达载体及反义表达载体，分别转染人正常皮肤成纤维细胞和HS成纤维细胞，采用qRT-PCR、Western-Blot观察miR-21对特定靶基因表达的调控作用；结果增生性瘢痕中胶原的含量高于正常皮肤；细胞外基质如COLI、COL III、Fibronectin（FN）及α-SMA在瘢痕中的表达量高；HS组织中miR-21表达明显升高，瘢痕成纤维细胞转染anti-miR-21可明显减少瘢痕相关基因的表达（FN，collagen，α-SMA）；HS组织中高表达的TGF-β1，可以促进成纤维细胞增殖，并促进其合成胶原等ECM；TGF-β增强HS组织的成纤维细胞中mir-21的表达，而抑制mir-21后，TGF-β的促纤维化活性降低；MIR-21抑制其靶基因Smad7的表达；结论1、与正常皮肤相比较，增生性瘢痕（HS）中有miR-21的高表达；2、miR-21通过在转录后水平影响TGF-β基因表达并调控特定靶基因活动而促进了HS的发生。