论文部分内容阅读
背景和目的 钠尿肽（natriuretic peptides,NPs）是一组具有利钠、利尿、舒血管和抗细胞增殖效应的多肽，具有抗心力衰竭、心肌肥厚和移植血管再狭窄的重要作用。钠尿肽受体（natriuretic peptide receptor,NPR）可分为鸟苷酸环化酶（guanyl cyclase，GC）耦联受体和非耦联受体。其中A、B受体亚型（NPR-A，NPR-B）是GC耦联受体，介导NPs发挥重要的生物学功能；而C受体亚型不与GC耦联，属于清除受体，主要影响体内NPs的半衰期。 血管钠肽（vasonatrin peptide,VNP）是人工设计、合成的钠尿肽家族新成员，是心房钠尿肽（atrial natriuretic peptide,ANP）和C-型钠尿肽的嵌合体。已证实，VNP可有效地防治大鼠低氧性肺动脉高压和右心室肥厚，但其作用机制还不明了。NPR-C是直接影响NPs功能的重要因素，低氧时NPR-C水平的变化仍存在争议，VNP与NPR-C的关系也尚未见报道。内皮素-1（endothelin-1,ET-1）是机体缺血、缺氧时，血管内皮、平滑肌、心肌以及心成纤维细胞合成与释放的一种效应很强的缩血管多肽，能引起冠状动脉强烈收缩，造成心肌缺血，甚至坏死。ET-1还促进冠脉平滑肌增生，使管腔狭窄，进一步加重心肌缺氧。VNP对低氧心脏ET-1水平的影响如何，还不十分清楚。本研究首次应用慢性低氧大鼠模型，初步探讨VNP对低氧大鼠右心室NPR-C和ET-1的影响。 人乳内动脉（human internal mammary artery,HIMA）是心脏搭 宽四军区大学博士学位论大桥手术的主要供体血管之一。临床资料表明，移植后血管的痉挛程度是影响手术疗效的重要原因。己发现，VNP对大鼠主动脉和肺动脉具有显著的舒张作用，而VN’I，对HIMA的舒张作用还未见报道。本研究还首次探讨VN’P对HIMA的舒张作用及机制。为开发VN’P成为治疗冠脉搭桥术后血管痉挛的药物提供理论依据。 方 法 ＊)采用减压低氧的方法，模拟 5，500 m的高原低氧环境，饲 养低氧大鼠。对照大鼠在常压、常氧的条件下饲养。 O) 分别用定量PCR和原位杂交的方法分析右心室NPR（与 ETI 的InRNA水平，并用放射免疫测定法测量右心室 ET－1 蛋白含量的变化。同时也观察血浆ANP、右心室 CGMP水平的变化。 o） 采用离体血管灌流的方法，观察VNP对内皮完整和去内 皮HIMA的舒张作用，以及8－Br－cGW、NPR－A，B选择 性抑制剂HS1 八、鸟着酸环化酶选择性抑制剂美蓝 （methylene blue，MB）和＊”激活 K十通道（CaZ”－activated 矿山annel，KC＊的选择性抑制剂hA对这一过程的影响。 门 采用全细胞膜片钳技术观察VN’I，对大鼠肠系膜动脉血管 平滑肌（vascular smooth muscle cells，VSMCs）KC。的作用， 以及8Er七GMP、HS八 ＊和MB对这一过程的影响。 结 果 （1）可氧7～28 d心脏N’P又C InRNInRNA水平显著升高（P＜0＊5）， 一 5——Mp 2003 第四军区大学协士学位论X一 并呈现时间依赖性。每日腹腔注射 50～75 pg／kg的 VNP可 剂量依赖性地减弱低氧心脏NP＊－C的表达（P＜0刀5）。血浆 ANP浓度在低氧 28 d后显著升高（P＜0．05），VNP（75卜g／kg） 使AN P浓度进一步升高（P＜0刀1）。 O）VNP门5 pg／kg)使低氧诱导的心脏ET1 的水平显 著降低（P＜0刀5）。CGMP基础水平未见显著性差异，VNP （7 pg／kg）使低氧心脏的CGMP7k平略高于相应的常氧组， 但无显著性差异（P＞0刀5）。 （3）VNP（10”口一106mo凡）可剂量依赖性地舒张HIMA，该作 用无内皮依赖性。吕一Br－cGMP （l”’～10－’mo讥）可模拟 VNP 的血管舒张效应。HS－142一l（2 x 10”5 mo凡）或 MB（10－’ moUL）完全阻断 VNP舒张作用。TEA门“‘。of／L)减弱 VNP的舒血管作用。 ＊)VNP显著增强大鼠肠系膜动脉VSMCS的KcyVNP的这 一效应可以由8－Br－CGMP模拟，而被HS－142J或MB完 全阻断。 结 论 ＊)VNP抑制慢性低氧导致大鼠右心室NPR七时间依赖性的表 达增加，由此促进血浆内源性ANP水平进一步增加。VNP 还抑制慢性低氧导致大鼠右心室ET．l的表达增加，此过程 与细胞内。GMP水平的变化没有相关性。结果提示，抑制 NPR－C（清除受体）进而增加 NPs的活性和减弱 ET－l的表 达可能是VNP抗慢性低氧作用的重要机制。 一 6——Mp 2003 第四不巨大学博士学位论又 o)VNP对H例具有不依赖内皮的舒张作用，其作用主要是 通过作用于NPR－A，B，即钠尿肽GC受体，引起细胞内的 CGMP水平升高实现的。Kc。可能是其舒张作用的重要效应 分子。 该结果为应用VNP防治慢性低氧性心脏重构和血管移 植术后的痉挛提供了重要的