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目的：通过对肝细胞癌HepG2的聚焦超声实验;观察N2O是否增强 HIFU 对肿瘤细胞作用;探索笑气在超声医学中其增强空化效应现象。 方法：培养好的人肝细胞癌 HepG2单细胞悬液分组: C 组为空白组;N组为单纯N2O组：单细胞悬液经鼓泡法把N2O鼓入细胞悬液;时间30分钟;U组为单纯超声组：给予声强为300W聚焦超声辐照处理5s;N+U组为N2O和超声联合处理组：单细胞悬液用 N2O经鼓泡法处理30分钟后;立即给予以300W超声辐照处理5s。电镜观察细胞内超微结构的改变;经流式细胞仪检测细胞HepG2细胞死亡凋亡检测。流式细胞仪检测细胞凋亡因素：线粒体膜电位（MMP）、细胞内活性氧(ROS)、细胞内Ca2+浓度;Western blot法检测Cytochrome C、Capase 3、Bax、Bcl-2和GAPDH表达情况。 结果：透射电镜显示：C 组与N组相比;没有显著差异;四组相比;N+U 组中 HepG2 细胞碎裂情况最为明显。膜联蛋白 Annexin V-FITC/PI流式结果显示：C组与N组HepG2死亡率与凋亡率差异不具有统计学意义（p＞0.05）;N+U组中细胞死亡率与凋亡率明显高于其他组（p＜0.05）。流式细胞结果显示：在 N+U 组中;细胞内 ROS和Ca2+显著增加（p＜0.05）;膜电位下降（MMP）（p＜0.05）。Western blot检测结果：N+H组CytochromeC、Caspase 3和Bax显著增加;Bcl-2显著被抑制。 结论：HIFU联合N2O相较于单独使用HIFU能对HepG2细胞产生更强的杀伤作用;包括膜电位下降、细胞内活性氧和Ca2+浓度增高;启动凋亡因子CytochromeC、Caspase 3和Bax;提示笑气的确能增强HIFU效应;我们猜测笑气可能是一种空化效应增强剂。