枯草芽孢杆菌FB123产生的枯草菌素的研究

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本文主要是对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)FB123产生的枯草菌素进行分离纯化、表征以及初步结构的研究。对Bacillus subtilis FB123所产粗枯草菌素的理化性质及抑菌谱的研究表明粗枯草菌素最适合作用pH为6,具有较好的酸碱稳定性;最适作用温度为40℃,热稳定性较好。多种蛋白酶可使其部分失活。Na+、Fe2+、Zn2+和Ca2+离子对其具有增效作用,而Mg2+、Al3+、K+和Cu2+离子会部分抑制其抗菌活性。有机溶剂能明显抑制其活性。粗枯草菌素的抑菌谱较宽,对多种细菌以及真菌都具有良好的抗菌作用。利用硫酸铵沉淀、Sephacryl S-200层析、DEAE-Sephamse Fast Flow层析从粗枯草菌素中分离出主要活性组分P2、P3-2、P4、P5。P3-2经SDA-PAGE电泳鉴定为单亚基蛋白,分子量为14.8kDa,等电点为3.64,采用Edman降解法测得N端15个氨基酸序列为N-DREISEGSVDQSSWC-15。采用过碘酸-Schiff试剂染色法PAS和苏丹黑B脂染色法对P3-2进行糖基、脂基研究,结果表明该枯草菌素可能为一种不含糖的脂蛋白;P3-2对蛋白酶不敏感;具有广泛的pH活性范围;30℃为其最适作用温度,具有很好的热稳定性;有机溶剂能明显降低P3-2的抑菌活性;K+、Zn2+、Ca2+、Na+能部分抑制P3-2的活性,而Al3+、Mg2+、Fe2+、Cu2+对P3-2具有增强作用;P3-2对其亲缘相近的革兰氏阳性菌有强的抑制作用,对革兰氏阴性菌大肠杆菌无抑菌作用,但对部分真菌也有抗菌作用。研究P2活性组分:1.测得P2 N端8个氨基酸序列为N-(Q、M)KPINISD-8。2.P2活性组分对部分真菌具有较强抑制作用,表明在相同浓度下P2的抑制真菌活性要比粗细菌素以及P3-2组分活性要高。
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