目的:建立谷红注射液中主要成分的含量测定方法,并建立谷红注射液的HPLC指纹图谱,为谷红注射液内在质量的控制提供依据。方法:(1)采用AlltimaTM C18色谱柱(4.6 mm×250mm,5 μm),以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,流速为0.9 mL·min-1,检测波长为210nm、260nm、403 nm。(2)采用Folin-Ciocalteu 比色法,依据羟基红花黄色素A与山奈酚相对于谷红注射液最大吸收波长的吻合度,选择适宜的对照品和显色条件进行总多酚的含量测定。(3)应用HPLC法,采用AlltimaTM C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,检测波长0-7min为239 nm,7 min时切换为260 nm,36 min时切换为280 nm,建立谷红注射液的指纹图谱。结果:(1)乙酰谷酰胺、尿苷、腺苷、鸟苷、紫丁香苷、羟基红花黄色素A、脱水红花黄色素B在试验范围内线性关系良好(r>0.9996),精密度试验RSD<2%,24 h内稳定性试验RSD<2.3%,平均加样回收率在99.12%～100.68%,RSD<2%。(2)以羟基红花黄色素A计,10批谷红注射液样品中总多酚的含量分别为9.94、9.55、9.75、9.67、9.84、10.03、9.81、9.52、9.88、10.09 mg·mL-1。总多酚的平均加样回收率为 98.11%,RSD为1.68%(n=6)。(3)谷红注射液各成分得到较好的分离,以羟基红花黄色素A为参照物峰,确定了 21个共有峰,10批谷红注射液指纹图谱相似度大于0.973。结论:(1)所建立的HPLC-DAD法简便可靠,能同时测定谷红注射液中多种有效成分,可用于该制剂的质量分析。(2)所建立的Folin-Ciocalteu法简便、准确、灵敏度高,是定量谷红注射液中总多酚的可靠方法。(3)HPLC法可同时分离谷红注射液中的各成分,方法简单准确,稳定可靠,可作为谷红注射液指纹图谱的建立方法。